旋复代赭汤对大鼠胃平滑肌细胞收缩及信号转导通路的影响

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目的:探讨旋复代赭汤对大鼠胃平滑肌细胞收缩及信号转导通路的影响。方法:制备旋复代赭汤含药血清和空白对照血清。采用胶原酶消化法分别从大鼠胃体、胃窦、幽门中分离出单个的游离大鼠胃平滑肌细胞(GSMC),观察旋复代赭汤对大鼠胃平滑肌细胞的收缩效应,并观察旋复代赭汤在分别加入磷脂酶C(PLC)抑制剂U-73122、三磷酸肌醇受体(IP3R)拮抗剂肝素、胞内钙阻断剂TMB-8后对大鼠胃窦平滑肌细胞收缩效应的影响。采用原代培养的方法培养大鼠胃平滑肌细胞,采用免疫细胞化学法观察旋复代赭汤对大鼠胃平滑肌细胞中蛋白激酶C(PKC)蛋白表达的影响,采用原位杂交的方法观察旋复代赭汤对大鼠胃平滑肌细胞中CCKB/GASRmRNA、VIPR2mRNA、IP3R mRNA表达的影响。结果:1.旋复代赭汤含药血清可引起大鼠胃平滑肌细胞明显的收缩。2.PLC抑制剂U-73122、三磷酸肌醇受体拮抗剂肝素、胞内钙释放阻断剂TMB-8可以一定程度抑制旋复代赭汤含药血清对胃窦平滑肌细胞收缩作用。3.旋复代赭汤含药血清可以升高胃平滑肌细胞GASRmRNA的表达,降低VIPR2mRNA的表达。4.旋复代赭汤含药血清可以升高胃平滑肌细胞PKC的蛋白表达。5.旋复代赭汤含药血清可以升高胃平滑肌细胞IP3RmRNA的表达。结论:(1)旋复代赭汤可引起大鼠胃平滑肌细胞明显的收缩。(2)旋复代赭汤通过兴奋CCKB/GASR,提高CCK/GAS的分泌,抑制VIPR2,减少VIP的分泌,从而促进胃平滑肌细胞的收缩。(3)旋复代赭汤可以通过激活胃平滑肌细胞内PKC的活性,从而达到调控Ca2+,促进胃平滑肌细胞收缩。(4)旋复代赭汤通过激活IP3R,完成对Ca2+的调节,从而促进胃平滑肌细胞的收缩。
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