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背景:胆管癌是指起源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤,包括肝内和肝外胆管癌,约占消化道肿瘤的3%。近年来,随着诊断水平的不断提高,全球发病率呈上升趋势,在我国尤为突出。胆管癌具有起病隐匿,发展迅速,预后极差等特点。手术切除是胆管癌治愈的首选方法,但根治性切除(包括肝移植)仅为10%左右,中位生存期小于24个月。因此,发展新的筛选和诊断手段,寻找干预胆管癌有效的治疗靶点,对提高胆管癌患者的诊断率和生存率,控制复发率,改善预后具有相当重要的临床价值。microRNA是一类长19-25个核苷酸的内源性非编码RNA,可通过调控其靶基因参与的信号传导通路,影响肿瘤的发生和发展,发挥着类似于癌基因或抑癌基因的生物学功能,使其成为肿瘤基因治疗的新靶点。迄今为止,已被鉴定功能的miRNA为数不多,因此寻找及鉴定新的miRNA是癌基因或抑癌基因,是指导靶向治疗的关键。最新研究表明,microRNA-21(简写miR-21)在胆管癌细胞中呈高表达状态,在胆管癌组织中敏感性和特异性高达95%以上。提示miR-21有可能成为胆管癌早期诊断,演进、术后疗效跟踪、随访评价一个新的标志物。在临床上,胆管癌组织选取非常困难,而且创伤很大。由于循环miRNA检测的无创性,使其有望成快捷、敏感的肿瘤诊断、预后分析的分子标志物。我们近期研究结果显示:miR-21在胆管癌组织中表达上调,显著高于癌旁组织,与胆管癌的分化程度、肝内外转移、生存期和预后密切相关。更重要的是发现了胆石症和胆管癌患者胆汁中miR-21存在差异表达。目的通过干预胆管癌细胞中miR-21的表达,观察细胞侵袭、转移能力的变化,并进一步探究其内在机制。方法构建慢病毒载体,将miR-21基因感染胆管癌RBE细胞,分别设置过表达组,过表达对照组,抑制组,抑制对照组和空白对照组,行RT-PCR检测所构建5组稳定细胞株其miR-21含量,用Transwell侵袭实验和划痕实验检测处理过的RBE细胞其侵袭及转移能力。Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin等EMT相关基因及PTEN基因其相关蛋白表达情况。结果慢病毒MiR-21感染RBE细胞后其过表达组侵袭、转移能力明显高于阴性对照组和空白对照组;相反,MiR-21抑制组其侵袭、转移能力明显低于阴性及空白组。与EMT相关蛋白,其中N-cadherin、Vimentin在过表达组表达增强,E-cadherin表达降低;抑制组结果与过表达组相反。PTEN蛋白在过表达组减弱,抑制组表达增强;阴性组及空白组表达无差异。结论过表达miR-21增强胆管癌细胞侵袭及转移能力,抑制miR-21则可使胆管癌侵袭、转移能力减弱。miR-21可能通过作用于抑癌基因PTEN及EMT化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)来实现对于胆管癌细胞侵袭及转移能力的影响。