【摘 要】
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目的: 通过茶多酚(TP)对人肝癌细胞株SMMC-7721作用,观察TP对细胞增殖影响、细胞形态学改变、细胞周期改变,确定TP对SMMC-7721细胞的剂量反应关系。 TP作用细胞后,测定
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目的: 通过茶多酚(TP)对人肝癌细胞株SMMC-7721作用,观察TP对细胞增殖影响、细胞形态学改变、细胞周期改变,确定TP对SMMC-7721细胞的剂量反应关系。 TP作用细胞后,测定细胞周期素D1(CyclinD1)蛋白表达量的改变,初步探讨激活蛋白1(AP-1)、P16与CyclinD1在信号传导通路中的作用,阐明TP对人肝癌细胞的分子作用机制。 方法: 本实验以体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,观察TP对人肝癌细胞的生物效应,(1) MTT比色法测定细胞增殖率,确定TP对人肝癌细胞的剂量反应关系。(2) 苏木精-伊红(HE)染色法观察细胞形态学改变。(3) 流式细胞仪检测细胞周期。 为进一步探讨TP作用人肝癌细胞株SMMC-7721的机理,(1) 免疫细胞化学、灰度值分析比较,确定细胞CyclinD1和P16蛋白表达量改变。(2) 构建AP-1报到质粒,以psv-β-gal质粒为内参照测量AP-1蛋白活性。 结果: TP可抑制体外培养人肝癌细胞增殖,随着TP浓度增加,作用时间延长,细胞增殖率逐渐降低,其中48h内,25.0mg/L与50.0mg/L两剂量组增殖率差异有显著性(增殖率分别为94.12%和80.08%,t=4.011,P<0.01)。TP作用细胞后出现细胞凋亡改变,表现为细胞变小变圆,核染色质致密浓缩。在48h内随着TP浓度的增加,S期细胞从60.4%(0mg/L)降低到
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