昆明地区犬、猫球虫的自然感染率及小等孢样球虫的生活史与分子鉴定

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2008年5月至2009年10月收集昆明附近农村以及宠物市场的犬、猫粪样进行球虫流行病学调查及种类鉴定。结果400份犬粪便样品中,犬球虫的感染率为35.2%(141/400)。发现4种犬球虫:犬等孢球虫(感染率为9.7%)、俄亥俄等孢球虫(感染率为29.2%)、肉孢子虫未定种(感染率为5.5%)和哈曼德/神经孢子虫样球虫(感染率0.5%)。85份猫粪便样品中,球虫感染率为45.8%(39/85)。共发现4种猫球虫:猫等孢球虫(感染率为17.6%)、芮氏等孢球虫(感染率为33%)、肉孢子虫未定种(感染率为3.5%)和弓形虫/哈曼德样球虫未定种(感染率4.7%)。用动物实验感染的方法对犬粪便中的哈曼德/神经孢子虫样球虫卵囊和猫粪便中的弓形虫/哈曼德样球虫卵囊进行了生活史研究。孢子化的哈曼德/神经孢子虫样球虫卵囊分别感染犬、沙鼠、豚鼠和KM小鼠,再将这些感染动物的组织饲喂给犬。结果显示,沙鼠和豚鼠是其中间宿主,犬和KM小鼠不是其实验感染中间宿主。包囊不能经豚鼠感染给豚鼠,表明其具有严格的双宿主的生活史。弓形虫/哈曼德样球虫卵囊饲喂给KM小鼠和猫,再用感染动物的组织饲喂给猫,结果显示,猫和KM小鼠都是其中间宿主。包囊经昆明小鼠能够感染KM小鼠,表明其具有兼性双宿主的生活史。生活史研究表明,犬粪便中的哈曼德/神经孢子虫样球虫卵囊具有严格的双宿主生活史,鉴定为海氏哈曼德球虫;猫粪便中的弓形虫/哈曼德样球虫卵囊的生活史是兼性异宿主的,猫粪样中含有刚地弓形虫的卵囊。分别用海氏哈曼德球虫、犬神经孢子虫、刚地弓形虫和哈氏哈曼德球虫特异性引物JS4/JS5、Np6/Np21、Tox4/Tox5、CT1/HhammITS和Hham3R/Hham34F对实验感染获得的海氏哈曼德球虫和刚地弓形虫卵囊进行了PCR扩增。海氏哈曼德球虫的特异性引物JS4/JS5扩增出了一个267bp的目的基因片段,刚地弓形虫特异性引物Tox4/Tox5扩增出了一个529bp的目的基因片段。分子鉴定结果支持了动物实验感染的结果。
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