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核因子kappa B (NF-κB)是普遍存在于哺乳动物中的转录因子,其参与多种恶性肿瘤相关基因的表达调控。NF-κB在细胞增殖、抵抗凋亡、细胞迁移、血管新生等癌症发生发展过程中发挥关键作用,因此NF-κB信号通路已成为多种恶性肿瘤治疗和药物发现的一个重要靶点。PMS化合物是一系列同时具有抗血小板激活因子活性和抗HIV-1病毒活性的哌嗪类衍生物,本研究组前期研究证明其中PMS1077能够诱导B淋巴瘤Raji细胞的凋亡和急性早幼粒白血病HL-60细胞的再分化,但其作用机理尚不明确。本研究旨在以NF-κB信号通路为靶点探讨PMS化合物的抗肿瘤活性及其作用机理。首先在稳定表达NF-κB调控荧光素酶报告基因的前列腺癌细胞DU145和PC3中初步评价了11种PMS同系物对NF-κB活性的影响,其中PMS1077、PMS1120和PMS1144能够显著抑制肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的NF-κB信号通路活性,同时MTT实验证明此三种PMS化合物具有较低的细胞毒性作用；采用双荧光素酶报告基因系统进一步准确评价了PMS1077对NF-κB活性的影响,发现PMS1077(20、40、60和80μM)对NF-κB活性的抑制呈现浓度依赖效应；免疫印迹实验结果显示PMS1077能够抑制TNF-α诱导的NF-κB抑制蛋白(IKB-α)的磷酸化和降解以及NF-κB异源二聚体中p65的磷酸化；免疫细胞化学和细胞核质分离实验结果证明PMS1077抑制了TNF-α诱导p65的核转位；通过计算机分子动力学模拟对接手段推测PMS1077可能是通过直接结合IKK-β (IκB激酶p)亚基的激酶结构域从而抑制了后续信号通路的活化；MTT细胞增殖与流式细胞凋亡分析发现PMS1077能够显著促进TNF-α诱导的前列腺癌细胞凋亡；免疫印迹和RT-PCR对基因表达分析表明PMS1077处理细胞显著下调了NF-κB调控抗凋亡基因Bcl-xL、Bcl-2和Survivin的表达,同时促进了TNF-α诱导凋亡特征性蛋白分子PARP的裂解。综上所述,PMS1077可以通过下调前列腺癌细胞中NF-κB调控的抗凋亡基因表达而促进TNF-α诱导的细胞凋亡效应。本研究工作部分阐述了PMS化合物抗肿瘤活性的作用机理,为进一步优化该系列化合物的结构和改善其抗肿瘤生物活性提供了理论依据。