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目的:淋巴结转移是宫颈癌主要转移途径,也是影响宫颈癌患者预后的重要因素。假设miRNA能调节宫颈癌淋巴结转移,研究不同淋巴结转移能力的宫颈癌组织中的miRNA表达差异,筛选出淋巴结转移相关的miRNA,并且研究其调节淋巴结转移的机制。材料和方法:在宫颈癌新鲜标本中,用miRNA芯片筛选出不同淋巴结转移能力的宫颈癌的miRNA的差异表达,Real-time PCR验证miRNA芯片筛选的结果。在SiHa细胞株中过表达或低表达候选miRNA含量,通过体外Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。用慢病毒载体构建稳定转染候选miRNA的稳转株,并建立裸鼠宫颈癌细胞转移模型。通过生物信息软件、靶基因mRNA real-time PCR和Western Blot蛋白检测三种方法综合推断miR-652的靶基因。结果:niRNA芯片筛查显示,对比无盆腔淋巴结转移的宫颈癌组织,有盆腔淋巴结转移的宫颈癌组织中2个miRNA高表达(miR-142-3p,miR-652) (P<0.05),3个 miRNA低表达(miR-196b, miR-320b和miR-424) (P<0.05)。Real-time PCR证实筛选出的miRNA表达变化趋势与芯片结果相似,但只有miR-196b及miR-652的差异表达具有统计学差异(P<0.05)。Transwell实验显示,低表达miR-196b和过表达miR-652可以增进细胞迁移和侵袭能力,过表达miR-196b和低表达miR-652可以抑制细胞迁移和侵袭能力。未能发现改变niR-142-3p、miR-320b和miR-424表达量会影响细胞迁移或侵袭功能。综合上述结论,miR-196b和miR-652可能与宫颈癌淋巴结转移有关。从创新性考虑,暂选miR-652进行后续研究。在体内实验中,未有足够证据说明miR-652能增进肿瘤细胞的转移能力,但PET-CT显示miR-652可能有促进肝脏转移病变的趋势。综合Targetscan、miRDB、miRSearch、miRTarBase 和 miRwalk共5个miRNA数据库联合预测,并查阅靶基因资料文献,获得6个miR-652的候选靶基因,分别为BCL11A、ISL1、LLGL1、NPTN、NR4A3、YWHAH。在对以上基因mRNA表达水平的PCR检测中,发现miR-652过表达组ISL1、NR4A3和YWHAH基因的mRNA表达量下降(P<0.05), miR-652低表达组ISL1、NR4A3和YWHAH基因的mRNA表达量上升(P<0.05),变化趋势符合miRNA-mRNA结合改变。其余3个靶基因mRNA表达量变化未发现统计学差异(P>0.05)。miR-652过表达组YWHAH蛋白表达量减少,miR-652低表达组YWHAH蛋白表达量上升。未能发现miR-652的低表达和过表达影响ISL1和NR4A3蛋白表达量的改变。结论:miR-196b有抑制宫颈癌淋巴结转移的功能,miR-652有促进宫颈癌淋巴结转移的功能。YWHAH可能是miR-652的靶基因。