高密度培养类球红细菌发酵辅酶Q10及其代谢调控的研究

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ShakeBabyYTT
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究以本实验室保存的一株类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides) RS-6作为出发菌株,优化了摇瓶发酵培养体系,并以摇瓶优化结果为基础进一步在15L罐上对连续流加补料发酵工艺进行了优化,最终将发酵工艺放大至50 L及100 L。首先,我们对类球红细菌RS-6发酵培养条件进行了优化,得到的最优条件为接种时间22 h(OD660值为7左右)、接种量16%、摇瓶装液量50 mL、摇床转速210 rpm、温度32.5℃、初始培养基pH 6.5;在最优培养条件下,先采用正交试验对发酵培养基三种无机盐(硫酸镁、硫酸亚铁、氯化钠)进行了优化,再以上述试验最优结果为基础,选取了8种微量元素,研究它们的添加对辅酶Q10合成的影响,并对其中几种对辅酶Q10合成有促进作用的元素浓度进行了优化,最后得到三种无机盐及微量元素最佳组合为:硫酸镁8g/L,硫酸亚铁1.2g/L,氯化钠4g/L,氯化钙0.1g/L、硫酸锰0.01g/L、过硼酸钠0.1g/L。优化后辅酶Q10产量达到197.67 mg/L比优化前提高了15%左右。以摇瓶培养研究为基础,在15 L罐上先单因素优化连续流加补料发酵搅拌转速、通气量,得到最优通气量、转速分别为为2 wm(通气比)、500 rpm,在此条件下Q10产量达到1664.83 mg/L是分批发酵产量的15.5倍左右。通过分析不同通气量、转速对类球红菌生长、辅酶Q10合成的影响,我们发现较高的溶氧对类球红细菌生长有利但不利于辅酶Q10合成,为此我们研究了四种通气量、转速分段调节策略对辅酶Q10产量的影响,最终获得最优转速、通气量调节方式为:以较高搅拌转速、通气量起始发酵在48 h后逐步降低发酵罐搅拌转速及通气量对辅酶Q10的生产较为有利,通过此分段调控方式将产量进一步提升至1809.34 mg/L比单一转速、通气量最优条件产量1664.83 mg/L高9%左右。在最优转速、通气量调节方式下研究获得了发酵液最适残糖控制范围为5—10g/L,在此残糖范围内细菌生长、辅酶Q10合成都较快;在磷源(磷酸二氢钾)补加实验中我们得到当补料培养基磷酸二氢钾浓度为3.9g/L时能使发酵液维持一个较利于辅酶Q10合成的磷源浓度,此方法下单位菌体产量由原来的14.47 mg/g(DCW)提升至16.67 mg/g(DCW),虽然产量没有较大提升,但发酵周期从120 h降至96 h,糖耗由2600 g降为2000 g,从而降低了成本。最后我们用恒定等体积搅拌功率放大法将发酵工艺放大至50 L及100 L发酵罐。利用尾气质谱对50 L发酵罐尾气进行检测,分析二氧化碳释放速率(CER)、摄氧率(OUR)和呼吸商(RQ)等参数,结合底物浓度、菌体浓度、产物浓度、糖耗速率及糖耗累积随时间变化情况离线数据,我们对类球红细菌RS-6发酵周期进行了更全面的分析。进一步通过100 L发酵罐的放大,对将本株菌工业化生产辅酶Q10提供了实验依据。
其他文献
最近,财政部印发通知,就《会计法》修订中的重点问题面向社会公开征询意见建议:一是《会计法》规范的边界问题。二是国家统一的会计制度的执行问题。三是政府会计核算问题。四
目的:总结治疗老年中晚期宫颈癌植入化疗同步放疗所致不良反应的观察与护理体会。方法:对老年中晚期宫颈癌实施植入化疗同步放疗,治疗期间密切观察其疗效及不良反应并做相应的
惊厥是指全身或局部骨骼肌群突然发生不自主收缩,伴意识障碍,是小儿时期的常见急症,以婴幼儿多见,约为成人的10~15倍。现将2005—2007年我科收治的53例患儿的常见病因、治疗及护理
羊膜腔感染综合征是由于产前胎膜早破,潜在于阴道内的细菌,上行至宫内引起胎盘、胎膜、羊水和胎儿感染的症侯群。对我校3年来28例胎膜早破,合并羊膜腔感染综合征进行分析,以进一
随着科技的不断发展,人们对计算机应用越来越重视,现在有很多的企业发展只能够使用了计算机装置。在使用计算机装置的过程中,"五防"是十分关键的,微机"五防"的实现是离不开安
当下诗歌文体形式的特征当然可从多种向度去论析,但我认为主要表现为一种开放性:语言形式上,它跨越了优美、雅致、精炼、含蓄等标准,与其它文体之间的跨越和融合成为极普遍的现象
尖锐湿疣(CA)是发生于生殖器等部位的一种性传播疾病,是由人乳头瘤病毒(HPV)引起的增殖性疾病。该病易误诊、漏诊、病情顽固、手术治疗极易复发、可以癌变、严重危害人类健康。本
临床上以肋下触诊判断肝脏是否肿大存在较大的误差,使用影像学方法虽然较容易做出肝脏是否肿大或者缩小的判断,但使用传统肝脏各径线的超声检测值却难以对肝脏大小做出定量分析
护理安全是护理质量的重要标志,是护理管理工作的重点。基层医院住院设施、人员配置等方面均存在欠缺,如何利用现有资源配置,预防和降低护理安全事故的发生,探讨适合院内护理
世上的事物,既有存在,就必定有它的形式,中国新诗存在已近90年代,它的形式呢?应该说新诗自诞生之日起就有形式,这个形式是从国外引进,后经废名之口说出,就是“分行”。得是仅仅分析,岂