【摘 要】
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目的:探究β-catenin/Wnt信号转导通路在人骨髓源性间充质干细胞增殖中的调控作用。方法:首先分离、培养、并鉴定人骨髓间充质干细胞,测定其标志物及多向分化潜能。其次应用
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目的:探究β-catenin/Wnt信号转导通路在人骨髓源性间充质干细胞增殖中的调控作用。方法:首先分离、培养、并鉴定人骨髓间充质干细胞,测定其标志物及多向分化潜能。其次应用锂剂、GSK-3β抑制剂SB216763、槲皮素(Quercetin)及慢病毒介导的beta-catenin si RNA转染,正负向调β-catenin/Wnt信号通路活性,采用CCK-8法测定细胞增殖速度。结果:采用经典方法培养出的人源性间充质干细胞,经鉴定确认其特异性标记物,如CD29(95±3.7%),CD44(91±2.1%),CD73(98±1.4%),CD90(98±2.3%),CD105(76±6.2%)。经分化后可诱导为成熟的脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞,证明其具有多向分化潜能。通过小分子药物氯化锂或者SB216763抑制GSK3β蛋白从而激活β-catenin/Wnt信号转导通路可有效促进间充质干细胞增殖。该效应呈剂量相关性,5m M氯化锂组可提高细胞总数至对照组的1.4倍,SB216763(50μM)可提高细胞总数至1.6倍。相反,β-catenin/Wnt信号转导通路小分子抑制剂槲皮素可明显抑制MSC的增殖,慢病毒介导的β-catenin蛋白干扰也发挥了相似的效用。结论:β-catenin/Wnt信号转导通路在调控人源性间充质干细胞增殖中发挥了重要的作用。通过小分子药物调控β-catenin/Wnt通路可有效调控MSCs的增殖。该发现可为β-catenin/Wnt通路相关的疾病发生及骨代谢平衡紊乱的治疗与防治提供理论依据。
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