温阳通淋法对致慢性肾盂肾炎大肠杆菌体外细胞粘附作用的影响

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目的:探讨温阳通淋法对致慢性肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)体外尿路上皮细胞粘附作用的影响。方法:按照温阳通淋原则制取水溶性中药小分子物质;临床分离UPEC J96菌;进行UPEC J96毒力基因的检测,用PCR扩增方法扩增UPEC J96毒力因子papC、Hly、Cnf1、Aer;应用改良后的尿路上皮细胞原代培养方法,培养正常人尿路上皮细胞;观察按照温阳通淋法提取的水溶性中药小分子物质对UPEC J96与原代细胞粘附作用的影响。结果:受试UPEC J96菌株毒力因子papC、Hly、Cnf1、AerPCR扩增产物于各自扩增长度处出现预期扩增带,而普通E.coli未出现扩增带,表明papC、Hly、Cnf1、Aer为临床分离UPEC J96特异毒力基因;按照改良后的尿路上皮细胞原代培养方法培养的尿路上皮原代细胞,经形态学观察符合上皮细胞形态学表现,此结果表明改良后尿路上皮细胞原代培养方法是可行的,这为尿路上皮细胞原代培养提供了一种新的方法;按照温阳通淋原则提取的中药水溶性小分子物质可有效降低UPEC J96对体外尿路上皮细胞的粘附(P<0.05),且药物作用的强度与药物浓度呈正比(P<0.01);UPEC J96对宿主细胞的粘附作用在30分钟内随时间的增加而显著递增(P<0.05),30分钟时点后的UPECJ96对宿主细胞的粘附作用仍逐渐递增,但与30分钟时点无显著性差异(P>0.05);作为对照的普通UPEC对尿路上皮细胞粘附率与粘附指数在各个时点均为0。结论:按照温阳通淋原则提取的中药水溶性小分子物质可降低UPEC J96对体外尿路上皮细胞的粘附作用,是其治疗尿路感染的作用机制之一。
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