葡萄籽有效多酚的亚临界水提取及分离纯化研究

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葡萄籽来源广泛,是葡萄进行酿酒或者榨汁加工后废弃的部分。白藜芦醇和原花青素作为葡萄籽中主要的两种多酚类物质,有着巨大的药理作用和开发价值。由于两种多酚物理性质的差异,传统方法只能对其进行分别提取,成本高且效率低。本研究在不使用任何有机溶剂的条件下,利用亚临界水极性连续可控的原理,实现了不溶于水的白藜芦醇和溶于水的原花青素两种多酚物质的同时提取,工艺过程经济绿色,变废为宝。采用高效液相色谱和紫外分光光度计分别对白藜芦醇和原花青素进行定量分析。同时对提取参数进行响应面优化,得到最优提取条件并与传统方法进行了比较。采用大孔树脂对原花青素进行纯化,最后利用制备色谱得到两种多酚类物质。实验结论如下:(1)单因素试验探究了不同工艺参数对葡萄籽中白藜芦醇提取率的影响,提取率较大时各参数的数值分别为:压力1.OMPa,温度150℃,时间25min,料液比1:15g/mL。在单因素实验的基础上,通过响应面法进行参数优化,得到白藜芦醇的较优提取条件为:压力1.02MPa,温度152.32℃,时间24.89min,料液比1:15g/mL。此条件下白藜芦醇提取率为6.90ug/g。各工艺参数的影响顺序为:提取温度>提取时间>提取压力>料液比。在加标回收试验的验证中,相对标准偏差小于3%。(2)单因素试验探究了不同工艺参数对葡萄籽中原花青素提取率的影响,提取率较大时各参数的数值分别为:压力0.5MPa,温度170℃,时间20min,料液比1:15g/mL。较优提取条件通过正交试验优化而得,各参数值分别为:压力0.5MPa,温度170℃,时间22min,料液比1:15g/mL。此条件下原花青素的提取率为82.19mg/g。纯化原花青素所用的三种树脂中,吸附和解析能力均较优的是低极性的AB-8型大孔吸附树脂。纯化后粗液中原花青素的浓度比原来提高了 3.2倍。(3)两种多酚联合提取的最优条件为:压力0.5MPa、时间22min、温度152℃、料液比1:15g/mL。调整参数后白藜芦醇和原花青素的提取率分别为6.78μg/g和81.38mg/g,达到了各自最佳提取率的98.26%和99.01%。对比回流、微波、超声等提取方法,亚临界水具有时间短、效率高、零溶剂的优势。
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