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目的： 克隆刚地弓形虫硫氧还原蛋白（Thioredoxin, Trx）基因，构建原核表达载体，通过诱导表达和纯化蛋白，免疫家兔制备多克隆抗体。构建弓形虫Trx的真核表达载体，使Trx基因在HepG2细胞中过表达。 方法： 采用PCR技术扩增刚地弓形虫Trx基因，克隆至原核表达载体pET-28a（+）中，转化大肠埃希菌（E. coli）Rosetta，用IPTG诱导目的蛋白表达，利用镍亲和层析法获得纯化蛋白，同时免疫家兔制备多克隆抗体。通过Western blotting鉴定多克隆抗体的特异性。 构建Trx/p3XFLAG-Myc-CMV?-24真核表达载体，采用非脂质体阳离子聚合物RonfectTM将载体转染至HepG2细胞，Western blotting技术鉴定弓形虫Trx基因在HepG2细胞中不同时间点的表达情况。 结果： 成功从刚地弓形虫cDNA中扩增出Trx目的基因，构建了Trx/pET-28a（+）重组质粒，获得抗Trx重组蛋白的多克隆抗体。采用Western blotting检测出弓形虫Trx蛋白的特异性条带。 成功构建Trx/p3XFLAG-Myc-CMV?-24真核表达载体，转染HepG2细胞24 h、48 h和72 h后，Western blotting技术在47.7 KD处检测到均有特异性条带出现，且Trx在HepG2细胞中48 h表达量最高。 结论： 制备的兔抗Trx多克隆抗体具有较高的特异性，且Trx能在HepG2细胞内表达，这些为进一步深入研究刚地弓形虫Trx功能奠定了基础。