糖尿病肾病是糖尿病主要的微血管并发症，由于糖尿病患者特别是2型糖尿病患者发病人数在逐年增加，糖尿病患者的生存期较前延长，以及糖尿病性肾衰被国家终末期肾病治疗项目所覆盖，患者能得到更有效的治疗等因素，所以糖尿病肾病在全世界范围内已经成为导致终末期肾病的主要原因。　　 糖尿病肾病最早的临床表现是尿中出现少量的白蛋白，也就是微量白蛋白尿(尿白蛋白≥30 mg/day or20μg/min)。出现微量白蛋白尿的糖尿病患者就可以诊断为初期糖尿病肾病。如果此时没有特殊的干预治疗，约80％的初期糖尿病肾病患者尿蛋白排泄率将逐年增加10～20％，10～15年将进展到显性(临床)肾病期，此时出现临床蛋白尿(尿蛋白定量≥300mg/24h or≥200μg/min)。一旦出现临床糖尿病肾病，肾小球滤过率(glomerular filtration rate，GFR)一段时间后将会逐渐下降。无论1型糖尿病还是2型糖尿病，蛋白尿既是肾病的早期表现，又是糖尿病心血管并发症高发病率与高死亡率的标志。　　 全球范围内糖尿病患者已超过2.4亿，到2025年，这一数字有可能增加到3.8亿。大约40％的糖尿病患者将发展成肾脏疾病，而后者又加重了心血管并发症及其他并发症的风险。　　 在美国，糖尿病患病人群大约占人口的7％，估计有2080万人，而且这个数字还在逐年增加。其中约20％～30％糖尿病患者将最终发展为临床肾病。　　 在美国和西方国家，糖尿病肾病已经成为慢性肾衰竭最主要的原因，同时，糖尿病肾病也是导致糖尿病人死亡最主要的慢性并发症。美国30％～40％的终末期肾病是由糖尿病引起，而新增的透析患者大约44％是由糖尿病发展而来。　　 在中国，糖尿病控制也面临着两大挑战：一是由于肥胖、遗传因素等影响，糖尿病呈现低龄化；二是糖尿病肾病不断增加。近些年，中国发生了巨大的社会变化，经济发展、城市化以及生活方式的改变(比如营养过剩、活动减少)，导致糖尿病患者数目明显增加，患病人群估计从2000年的2080万人增加到2030年的4230万人。　　 众所周知，22％尿微量白蛋白阳性的2型糖尿病患者将在10内发展为尿蛋白阳性，也就是临床糖尿病肾病，而一旦患者发展成临床糖尿病肾病，那么患者的平均生存期约为7年。因此，如果不尽早的对糖尿病以及糖耐量异常的诊断及干预采取有效措施，糖尿病将会给中国带来巨大的经济和社会负担。无论1型糖尿病还是2型糖尿病，早期诊断和早期干预是延缓从糖尿病发展到肾衰竭的关键。　　 糖尿病肾病的病理特征是细胞外基质在肾组织过度聚集，引起肾小球系膜细胞过度增生及纤维化。以往的研究已经证实了糖尿病时高血糖诱导细胞外基质聚集，基质蛋白糖基化，肾小球系膜细胞机能异常以及肾小球硬化。　　 针对预防糖尿病肾病的发生及延缓糖尿病肾病的进展，当前所采取的治疗措施包括控制血压和/或血糖控制等是有效的，但是，进入血透的糖尿病患者仍在逐渐增加。因此，开发其他能有效阻止糖尿病肾病发生、发展的治疗措施是非常有必要的。　　 在中国，中医药治疗糖尿病已有数千年的历史，最近多项研究也已经证实，许多中药对糖尿病肾病有一定的治疗效果。基于长期的临床实践及对糖尿病肾病病机的认识，我们拟定了益气养阴活血方，本研究就是为了1)用中医理论对糖尿病肾病的病因病机及治疗方案进行探讨；2)动物实验验证益气养阴活血方对糖尿病肾病的疗效；3)探讨益气养阴活血方的作用机制，为糖尿病肾病的防治寻找新途径。　　 第一部分益气养阴活血法治疗糖尿病肾病的理论探讨　　 中医认为，糖尿病肾病的基本病机为气阴两虚。糖尿病后气阴两虚致血流不畅，脉络瘀阻，最后发展为早期糖尿病肾病。糖尿病肾病病机多端，但其关键在于气阴两虚夹瘀。气阴两虚是本，血瘀是标，气阴两虚是本病的根本病机。　　 根据大量的临床实践，我们认为糖尿病肾病的疾病过程为：疾病初期，主要表现为气、阴不足，脉络阻塞；疾病中期，阴气不足伤及阳，表现为气、阳不足；疾病晚期，阴、阳、气、血均不足，浊毒滞留于体内。　　 依照糖尿病肾病的病机，早期主要表现为气阴两虚、脾肾不足，脉络淤阻，我们拟定了益气养阴活血方(生黄芪、生地黄、山茱萸、山药、丹参、地龙、红花、山甲、当归、川牛膝等)。方中黄芪甘平，益气健脾益肾，健脾运而不燥，现代药理学研究也证实，黄芪能加速血液循环，扩血管，降压及减少尿蛋白；生地黄、山药、山萸肉，补气养阴，健脾补肾；丹参活血化瘀，地龙、穿山甲化瘀通络，从而达到疏通血络、消除瘀滞、清除水湿、疏通气机之目的。诸药共用，共同起到益气养阴、活血化瘀之效。　　 第二部分益气养阴活血法防治糖尿病肾病大鼠的药效学研究　　 目的：观察益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠的治疗作用。　　 方法：40只SD大鼠随机分为4个组：正常组、模型组、贝那普利治疗组和益气养阴活血方治疗组，除正常组外，余3个组大鼠用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病肾病大鼠模型，贝那普利组予贝那普利治疗，10mg.kg-1.d-1灌胃，中药组予益气养阴活血中药治疗，10mL.kg-1.d-1灌胃，模型组、正常对照组同时灌服等量的蒸馏水。给药8w后检测各组大鼠血糖、血清果糖胺、血脂、血清白蛋白和24h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白水平等指标。　　 结果：益气养阴活血方和贝那普利对糖尿病肾病大鼠肾组织、大鼠24h尿蛋白定量、血脂、血清果糖胺、尿β2微球蛋白水平等均有改善作用，益气养阴活血组大鼠血清果糖胺明显下降，由3.37±0.58 mmol/L降为3.11±0.57 mmol/L，P<0.05；尿蛋白由11.21±2.66 mg/24h降为9.37±0.73mg/24h，P<0.01；血清白蛋白由28.15±3.04 g/L提高到30.26±2.64 g/L，P<0.05。病理学发现，两个治疗组的肾小球系膜增生及基质增厚现象明显缓解。　　 结论：益气养阴活血方可控制糖尿病肾病大鼠的血糖和尿蛋白，对糖尿病肾病大鼠具有治疗作用。　　 第三部分益气养阴活血法对糖尿病肾病大鼠肾皮质糖基化终产物及其受体的影响　　 目的：观察益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾皮质糖基化终产物及其受体mRNA表达的影响，探讨其治疗糖尿病肾病的作用机制。　　 方法：用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病肾病大鼠模型，模型大鼠随机分为空白对照组，模型组，贝那普利治疗组和益气养阴活血方治疗组，并用相应的药物干预，给药8周后检测各组大鼠肾皮质中晚期糖基化终产物的含量，用免疫组化法检测肾皮质中晚期糖基化终产物的表达，用RT-PCR的方法检测肾皮质RAGE mRNA的表达。　　 结果：糖尿病肾病大鼠肾皮质AGEs含量明显增加，RAGE mRNA出现过度表达。经中药治疗8周后肾皮质AGEs含量明显减少，由513.26±97.2 AUF/mg降为417.35±89.9 AUF/mg；RAGE mRNA表达明显下调，由1.51±0.01降为0.62±0.04，P<0.01。　　 结论：益气养阴活血方能够减少AGEs在肾皮质的积累，下调糖尿病肾病大鼠肾皮质RAGE-mRNA的过度表达。　　 第四部分益气养阴活血法对糖尿病肾病大鼠肾皮质TGF-β1和Smad表达的影响　　 目的：观察Smad在糖尿病大鼠肾脏中的表达及益气养阴活血方对其表达的影响。　　 方法：用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型，随机分为正常组，模型组，益气养阴活血方治疗组和贝那普利治疗组，并用相应的药物干预，给药8周后处死大鼠，用RT-PCR检测TGF-β1和Smad2，Smad3，Smad7在肾组织的表达水平。　　 结果：模型组大鼠。肾组织中TGF-β1、Smad2和Smad3的表达明显增强，Smad7的表达明显减弱。经治疗后，益气养阴活血方组和贝那普利组肾脏中TGF-β1表达较DN组均有下降，由1.56±0.21分别降为0.88±0.12和0.81±0.16，P<0.01；Smad2和Smad3表达也有下调，两个治疗组之间的差异无统计学意义；益气养阴活血方组和贝那普利组Smad7表达较模型组均有上升，由0.52±0.06分别上调为1.28±0.18和1.19±0.17，P<0.01；而且益气养阴活血方组的表达要强于贝那普利组，二者之间的差异有统计学意义，P<0.05。　　 结论：益气养阴活血方对糖尿病大鼠。肾脏有保护作用，其机制可能与调节肾脏中TGF-β1和Smad2，Smad3，Smad7表达水平有关。