红球菌R04细胞的不对称分裂及其在联苯胁迫下的分裂抑制

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细胞的生长和分裂是所有生命的基本过程,细胞分裂方式对维持原核生物的形态多样性具有重要作用,为了研究红球菌R04细胞的分裂方式及联苯对其形态和生长分裂的影响,本研究利用荧光显微镜、扫描电子显微镜及透射电子显微镜分析红球菌R04在不同培养条件下的分裂方式,结果表明,红球菌R04细胞表现出对称分裂(约占30%)和不对称分裂(约占70%)两种分裂方式,且培养条件不影响具有不对称分裂细胞亚群所占的比例。隔膜的定位主要分布于细胞长度的30%到50%之间。在代谢联苯的过程中,红球菌R04细胞的生长分裂会受到联苯的抑制,但不影响红球菌R04细胞的分裂方式,在联苯胁迫下,细胞形成丝状化,表现出异常分裂,随着培养时间的延长,在细胞分裂指数后期至转换期,细胞能够进行正常分裂。说明联苯/多氯联苯对其降解菌——红球菌R04的生殖和生长有较强影响,但这种影响是可以被红球菌R04所拮抗的,红球菌R04能够自我修复,恢复正常分裂。通过转录组测序分析发现红球菌R04的RHOGL008438蛋白可能与细胞分裂有关。为研究其生理功能,通过构建融合表达质粒在大肠杆菌BL21中异源表达RHOGL008438蛋白,并在荧光显微镜下观察该蛋白对大肠杆菌细胞形态的影响。结果表明,过量表达RHOGL008438蛋白会使大肠杆菌细胞出现丝状化,表明RHOGL008438蛋白干扰了大肠杆菌细胞隔膜的正常形成导致细胞丝状化。通过序列同源性分析,确定RHOGL008438蛋白为细胞分裂过程中的主要分裂蛋白FtsZ。活细胞成像拍摄红球菌R04细胞的生长过程同样表明其具有不对称分裂方式,经FITC标记的万古霉素(FV)作用红球菌R04细胞后荧光显微镜检测,结果显示细胞两极发生荧光,表明红球菌R04细胞属于两极生长模式。确定了红球菌R04细胞中的Fts Z蛋白以及该细胞的生长模式对于后续深入研究其分裂机制具有重要的意义。
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