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目的:1.分析组蛋白去甲基化酶LSD1在直肠癌肿瘤干细胞(CSCs)干性维持中的调控作用。方法:1.首先建立直肠癌细胞CACO2-LSD1敲降稳定细胞系,然后采用Q-PCR检测直肠癌细胞CACO2中LSD1 mRNA的表达情况,并对mRNA进行定量分析;采用经Western Blot检测直肠癌细胞CACO2中LSD1蛋白表达情况,并对蛋白灰度值进行定量分析。2.其次采用克隆成球实验检测LSD1对直肠癌CACO2干细胞特性的影响;采用Aldeflour试剂盒,通过流式细胞仪检测直肠癌CACO2干细胞比例;采用Transwell实验检测LSD1对体外侵袭能力的影响。结果:1.Q-PCR检测直肠癌细胞CACO2中LSD1 mRNA的表达情况,并对mRNA进行定量分析,结果显示:结果显示CACO2-1(LSD1敲降组)的LSD1mRNA表达显著受到抑制,差异具有统计学意义;经Western Blot检测LSD1蛋白,并对蛋白灰度值进行定量分析,结果显示CACO2-1(LSD1敲降组)的LSD1蛋白表达显著受到抑制,差异具有统计学意义。2.通过克隆成球实验检测LSD1对直肠癌CACO2干细胞特性的影响,发现CACO2-1(LSD1敲降组)与CACO2-2(LSD1抑制剂-RN1组)克隆成球能力显著低于荧光对照组,差异具有统计学意义;使用Aldeflour试剂盒,通过流式细胞仪检测干细胞比例,发现CACO2-1(LSD1敲降组)与CACO2-2(LSD1抑制剂-RN1组)干细胞比例显著低于荧光对照组,差异具有统计学意义;通过Transwell检测LSD1对体外侵袭能力的影响,发现CACO2-1(LSD1敲降组)与CACO2-2(LSD1抑制剂-RN1组)体外侵袭能力显著低于荧光对照组,差异具有统计学意义。结论:LSD1在直肠癌CSCs表型,干性维持及自我更新调控中发挥重要作用,及与经典的直肠癌肿瘤干细胞标志物ALDH1表达密切相关,抑制LSD1可能是直肠癌靶向治疗的潜在分子靶点之一,我们对直肠癌CSCs表观遗传调控机制的研究将有利于寻找新的药物靶点,为进一步设计和合成新型LSD1家族组蛋白去甲基化酶抑制剂的研发提供了有意义的实验参考,为寻求新的直肠癌治疗策略提供依据。