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目的本实验通过体外细胞实验和动物实验探究IL-8 2型受体(CXCR2)拮抗剂SB225002对前列腺癌细胞LNCAP、DU-145和PC-3侵袭能力的影响以其分子机理。方法1.购买前列腺癌组织芯片,应用免疫组化法检测IL-8与BSP在不同临床病理特征的前列腺癌组织中的表达情况并分析二者的相关性;2.分别培养前列腺癌细胞DU-145,LNCAP和PC-3,其中LNCAP属于雄激素依赖性前列腺癌细胞,DU-145和PC-3属于非雄激素依赖性,使用MTT法检测SB22500对三株细胞的生长抑制作用;3.Transwell与划痕实验检测SB225002对三株细胞侵袭和迁移的影响;4.三株细胞分为SB225002处理组和对照组,处理组在培养基中加入SB225002(终浓度10μM),对照组加入等体积的DMSO,培养72h后,使用Western blot检测侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9、BSP和αVβ3的表达改变情况;5.使用PI3K通路抑制剂处理三株细胞,Western bolt检测两种信号通路被抑制后上述四种侵袭相关蛋白表达的改变情况。最后使用Western blot检测SB225002处理后,PI3K信号通路中部分蛋白的表达以及磷酸化改变情况。6.动物实验:通过小鼠皮下种植前列腺癌细胞的方式构建前列腺癌移植瘤模型。小鼠分为阴性对照组、皮下种植组与种植+给药组,采用腹腔注射的方式定期给予种植+给药组腹腔注射SB225002,给药过程中测量小鼠皮下肿瘤体积变化,给药一段时间后,处死小鼠剥离肿瘤,应用免疫组化法检测移植瘤组织中四种蛋白表达情况,同时取小鼠眼球动脉血,使用ELISA法检测三组小鼠血清中BSP浓度。结果1.IL-8与BSP在发生远处转移的前列腺癌组织中呈高表达,在未发生转移的组织中呈低-中度表达,并且IL-8与BSP的表达水平在前列腺癌组织中呈中度正相关。2.IL-8受体拮抗剂能够明显抑制非雄激素依赖性前列腺癌细胞的增值。侵袭方面,SB225002能够明显减弱前列腺癌细胞的侵袭能力,并且能够降低MMP-2和BSP在前列腺癌细胞中的表达水平。3.PI3K信号通路抑制剂能够降低MMP-2,BSP,αVβ3的表达水平;SB225002能够降低AKT和mTOR的磷酸化水平,说明SB225002可能是通过抑制PI3K通路信号传导发挥抑制侵袭作用的。4.SB225002能够抑制前列腺癌移植瘤在体内生长,并且降低肿瘤组织中BSP和MMP-2的表达水平。同时抑制肿瘤细胞分泌BSP。结论IL-8 2型受体拮抗剂能够抑制前列腺癌细胞增值并且降低其侵袭能力,他可以通过抑制AKT/mTOR的磷酸化减弱PI3K信号通路的传递从而降低MMP-2和BSP等与侵袭有关的蛋白的表达水平实现抑制前列腺癌侵袭的作用。