论文部分内容阅读
癌症是全人类共同面临的巨大挑战,全世界每年因癌症而死亡的人数高达数百万;其中,宫颈癌是女性恶性肿瘤中最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在发展中国家妇女中占很高比例。本研究通过姜黄素处理宫颈癌细胞,研究其对宫颈癌细胞生长与增殖的影响,目的在于为阐明姜黄素在抗肿瘤方面的作用机制和分子机理提供理论基础和实验依据。研究中利用体外培养HeLa细胞,以0μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1和20μmol·L-1等不同浓度的姜黄素处理HeLa细胞;通过MTT、Brdu染色和平板克隆实验研究姜黄素对HeLa细胞生长与增殖的影响。实验结果显示姜黄素对HeLa细胞有明显的生长抑制作用,并呈现出剂量依赖关系。通过免疫荧光共聚焦显微镜技术,研究姜黄素与上游结合因子(Upstream binding factor,UBF)在细胞中的定位情况;实验结果显示姜黄素在细胞核中存在定位现象,而且,姜黄素和UBF存在共定位现象。通过实时定量聚合酶链式反应(Q-PCR)实验,研究姜黄素对HeLa细胞核仁rDNA转录的影响;实验结果显示姜黄素可以降低rDNA转录的水平。利用Western blot技术,研究姜黄素对HeLa细胞中UBF磷酸化的影响;实验结果显示姜黄素可以下调UBF磷酸化的水平。本研究在细胞水平上证明姜黄素可以抑制HeLa的细胞生长和增殖,且呈现一定的剂量效应。在分子水平上,姜黄素降低转录因子UBF磷酸化的水平;而且,还使rDNA转录的水平降低。因此,推断姜黄素可能通过下调p-UBF的表达量,进而引起rDNA转录水平的降低,最终抑制HeLa的生长和增殖。但鉴于细胞生长代谢的复杂性和姜黄素广泛的生物学作用,转录因子UBF可能是姜黄素影响HeLa细胞生长的作用靶点之一,但其具体的机制和分子机理还有待进一步的研究和探讨。