淋巴细胞核移植重构胚的构建及其CD分子表达的初步研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jimmyzcc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
在哺乳动物核移植研究中按照核供体细胞来源的不同可以分为两类:以胚胎卵裂球为核供体的胚胎细胞核移植和以各种体细胞为核供体的体细胞核移植。小鼠作为重要的试验模式动物在核移植研究中起着不可替代的作用。目前对于小鼠卵的显微操作方面也有许多,但大部分方法的实施需要借助于特殊的装置(如Piezoimpact装置、Spindle—View偏振光系统)或对卵的后期发育有明显副作用。为了能够找出一种既容易操作,又不需要特殊设备的核移植方法,本论文对以前的核移植方法进行了改进并用来构建重构胚。即首先以预先吸有细胞核或细胞的注射针在固定于持卵针上的卵母细胞透明带上穿刺两个孔,然后一边缓慢的将注射针回拔至卵周隙中,一边逐渐增加持卵针中的负压,直至极体与目标核质被完整的吸入持卵针中而完成去核,最后在不拔出注射针的情况下直接注射细胞核或完整细胞进而完成重构胚的构建。通过对重构胚去核效率和成活率的分析统计表明,用此方法可以在只有倒置显微镜和显微操作仪的条件下一次性快速的完成去核和注核,大大提高了细胞核移植的效率和重构胚成活率;更重要的是该方法操作简单,可以很快被新手掌握,易于在实际工作中推广应用。本论文还利用淋巴细胞作为供核细胞构建重构胚,在重构胚发育的特定时间段对供体细胞核在重构胚中所处的状态进行观察,并用CD分子单克隆抗体对重构胚表面CD分子以及供体细胞CD分子残留进行检测。结果表明移核重组淋巴细胞其基因组再程序化过程短于24小时,期间如果不能实现基因组的再程序化可造成重组细胞的死亡;在重组淋巴细胞基因组再程序化过程中,仍有淋巴细胞特定分化抗原的表达,但在其后的细胞分裂过程中此类抗原的基因表达被关闭。提示基因组在卵母细胞质特定成分的作用下启动再程序化的过程中存有基因转换表达的递进程序。当细胞核的生理时钟重新调回到它的胚胎初始状态时,即以特定的时空表达程序向胚胎发育的方向进行程序化表达。该论文为进一步研究供核细胞基因组再程序化的分子机制提供了必要的技术和初步理论平台,将有助于阐明核一质重组细胞的基因组编程规律及细胞定向分化的分子机制,并在当今生物医学领域中具有重要的实践意义。
其他文献
模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs)是识别微生物表面病原体相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)的一类先天免疫分子,肽聚糖识别蛋白
玉米的适应性强、种植范围广,是山西重要的粮食和经济作物,随着经济的高速发展和人口的迅速增加,玉米在工、农业中的用途越来越广泛,研究如何提高玉米的产量和品质具有十分重要的意义。本文从山西玉米产量分析入手,采用数量生态学中的PCA和DCA两种排序方法,分析了山西生态气候因子与玉米产量的分布规律,并基于GIS做了生态气候分区,最后采用积分回归方法具体分析玉米各生育阶段的生态气候因素与玉米产量的关系,为合
将中草药中分离提取的天然小分子化合物用于新药的开发因其安全性高毒副作用小等优点成为药物研发十分具有潜力的领域。木脂素(lignan)是一类自然界分布很广的小分子化合物,有抗肿瘤、抗病毒、保护肝脏、抗氧化、血小板活化因子拮抗活性等多种生物活性。虽然木脂素类化合物在体内的作用靶点很多,但CFTR氯离子通道作为木脂素类化合物的分子靶点并不十分明确。囊性纤维化跨膜电导调节因子(cystic fibrosi
土壤有效磷含量严重匮乏和磷矿石资源即将耗竭是限制水稻生产的重要因素。挖掘与利用近缘野生稻磷高效利用基因,培育耐低磷新品种是解决磷资源短缺的最重要途径,具有重要的理论和实践价值。本研究以东乡野生稻耐低磷渐渗系IL171及其双亲(栽培稻?协青早B?和东乡野生稻)为试材,采用cDNA-AFLP(cDNA-amplified fragment length polymorphism)技术分析其幼苗期应答低
摘要:随着社会生活的信息化和经济的全球化,对英语教学提出了更高的要求。初中英语教学的重心虽然已转移到读写能力培养上,但听说能力同步发展的重要性仍不可忽视。听是理解和吸收口头信息的一种交际能力,提高听力不仅有利于说、读、写三项技能的发展,而且更为日常交际打下坚实基础。努力营造一个听英语的环境,充分利用课本录音和同步听力训练,坚持上好听力课,反复练习,指导听力解题思路与应试技巧,全面提高学生的听力水平
湿地是自然界最富生物多样性的生态系统和人类最重要的生存环境之一,其具有的生态功能和作用是其他任何类型生态系统所不能替代的,加大对湿地的研究有助于为保护湿地提供科学依
本研究对中国汉族人群DC-SIGN/DC-SIGNR颈区重复序列编码区-外显子4的遗传多态性分布特征进行了大样本分析,并进一步探讨了其与HCV感染遗传易感性的相关性。 研究目的:
每年3-4月份举办的上海鲜花港郁金香花展在40天左右的时间内共吸引20万游客前来赏花、休闲、游玩,其秘诀在于鲜花港的设计师和技术人员通过早花、中花、晚花品种的合理搭配、不同球根类花卉的点缀和分层种植技术及花期调控技术的应用延长了花期,并通过大色块的布景、几何图案的设计以及与周围景观的协调呼应,为游客展现出了一幅幅色彩艳丽、层次分明、错落有致的花与自然相和谐的美丽画卷,展现出郁金香等球根花卉艳丽、高
松材线虫病是松属树种的一种毁灭性病害,主要由松褐天牛传播,可危害多种松属植物。由于其发生和发展涉及到松树寄主、媒介昆虫、松材线虫、相关的微生物以及环境条件等多种因
本文以转正义甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶(CaGPAT)基因烟草和野生型烟草为实验材料,研究了转基因烟草类囊体膜脂组成的变化,高温胁迫对转基因烟草光合速率和荧光特性的影响,以及