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随着人们对抗生素的耐药性、药物副作用的研究越来越深入,开发新型的天然抗菌药物成为当前抗菌药物的研究热点。抗菌肽作为一大类新型抗菌的天然多肽抗生素,能杀死耐药菌株,且其杀菌机制使病原菌不易产生耐药性突变,从而具有广泛的应用前景。但目前抗菌肽的来源主要为天然提取,成本相对较高。使用分子生物学方法,将目的基因转入菌体进行大量表达,降低纯化的技术难度和成本。本文重点研究家蝇抗菌肽基因Md-Cec在大肠杆菌中的表达,并对表达产物进行分离纯化和活性检测。以家蝇(Musca domestica)蛹的总RNA为模板,通过RT-PCR方法获得家蝇抗菌肽基因Md-Cec,目的基因插入质粒pMAL-c2x重组后转入表达菌株进行诱导表达。通过提取和纯化诱导表达蛋白,得到了纯品。最后初步测定纯化蛋白的抑菌活性。实验结果表明：以家蝇蛹总RNA为模板,RT-PCR得到了家蝇抗菌肽基因Md-Cec,成功构建了克隆载体pMAL-Md-Cec,且Md-Cec基因测序结果与Genebank一致。根据家蝇抗菌肽核酸序列和编码的氨基酸序列对蛋白质的理化性质和结构进行了分析预测。构建的重组载体pMAL-Md-Cec最终选择BL21(DE3)PlysS为最适表达菌株,IPTG浓度0.5mM,诱导时间4小时为最佳诱导条件,诱导后表达量较高。表达菌体破碎提取经直链淀粉树脂柱纯化,得到纯度较高且浓度较高的表达蛋白(对照蛋白pMAL (P)的含量为：7.565mg/mL重组蛋白；pMAL-Cec(A)的含量为：6.170mg/mL)。菌内抑菌生长曲线的测定,重组菌株相比对照菌株对自身均有一定的抑制作用；纯化蛋白结果表明对枯草芽孢杆菌和沙门氏菌具有一定的抑菌活性。