东海典型赤潮浮游植物对磷营养盐变动的生理生化响应

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本论文以东海典型赤潮藻东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)、中肋骨条藻(Skeletonema costatumn)和一种硅藻生理模式生物威氏海链藻(Thalassiosira weissflogii)为研究对象,采用生理学和蛋白质组学结合的手段,研究了三种藻在磷酸盐变动条件下的细胞内生化组成及其细胞内代谢途径的变化。主要结果如下:  1.营养盐吸收动力学实验表明,东海原甲藻具有一套磷酸盐转运系统,而中肋骨条藻和威氏海链藻具有两套磷酸盐转运系统,因此,中肋骨条藻和威氏海链藻能够在低磷条件下利用高亲和磷转运系统来吸收无机磷。  2.威氏海链藻细胞内有一系列的应对磷饥饿条件的策略,如利用细胞内的磷库,同时上调高亲和磷转运蛋白提高磷酸盐吸收速率,并合成硫脂来减少细胞内磷脂双分子膜对磷的需求。同时,威氏海链藻会减少光捕获蛋白和所有色素的含量,并下调蛋白合成过程,提高细胞内的糖酵解过程来提供能量,细胞内的蛋白含量和碳水化合物含量也显著下调。  3.磷饥饿条件下,东海原甲藻细胞内Chlα含量显著下降,但其多甲藻素和硅甲藻黄素以及Chlc1+c2等捕光色素的含量维持不变,并提高其细胞内捕光色素复合体蛋白含量来保持其光合作用的捕光能力;同时卡尔文循环中的固碳和还原过程上调,因此可以在细胞内积累碳水化合物。  4.磷饥饿的威氏海链藻添加f/20培养条件(3.6μmol·L-1,PO43-)的磷酸盐后表现出超补偿生长现象,其它培养条件为等补偿生长现象,但f/16处理组(4.5μmol·L-1,PO43-)前三天的比生长速率最小。表明磷饥饿处理会促进威氏海链藻基于叶绿素表征的生长速率,两轮的处理之后最大生物量会显著降低。  5.磷饥饿处理会降低中肋骨条藻的生长速率和最大生物量,添加3.5μmol·L-1磷酸盐后,在8小时内,磷饥饿后中肋骨条藻快速合成Chlα,同时积累多聚磷酸盐。东海原甲藻细胞内的磷储库比较大,磷饥饿处理对东海原甲藻的生长速率和最大生物量没有显著影响,且在磷添加8小时后并不合成Chlα,只积累多聚磷酸盐,  6.磷饥饿的威氏海链藻的在添加磷酸盐后,Chlα恢复到对照组水平,甚至f/16添加组可以合成超过对照组的Chlα。添加f/20组和f/16组细胞内都只有一部分光捕获蛋白含量提高。添加磷酸盐后两个添加组的细胞内光合作用传递链上的相关蛋白都上调表达,f/20组细胞内的PSⅡ的整体蛋白都上调表达,这一结果解释了藻类添加实验后光合作用速率上升的原因。  7.磷饥饿的东海原甲藻细胞添加磷酸盐后,f/40添加组(1.8μmol·L-1,SRP)的光捕获蛋白与主要的光捕获色素(Chlα和硅甲藻黄素)都超过了对照组,显著提高了东海原甲藻细胞的光捕获能力。而f/2添加组(36μmol·L-1,SRP)的Chlα含量比对照组略低,且细胞内的大部分光捕获蛋白下调表达,可能是由于细胞内对蛋白合成途径进行了调整。
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