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目的：糖尿病高凝状态导致的血栓形成倾向在血管并发症中起重要作用,微囊泡(MV)是导致糖尿病高凝状态的最新因子,在动脉血栓形成过程中其重要作用,而氧化应激是糖尿病和微囊泡产生的重要共同机制。本研究中以体外培养的THP-1细胞为研究对象,研究2型糖尿病重要的生化特征即高糖和高脂状态下单核细胞能否产生微囊泡及其初步机制,为糖尿病血管血栓形成导致血管病变的发生发展提供新的理论基础。方法：以体外培养的THP-1细胞为模型,以30mM葡萄糖作为高糖组处理因素、25μg/mL ox-LDL作为高脂组处理因素。1.采用ELISA技术检测高糖高脂刺激THP-1细胞20小时后MV含量,并检测ERK抑制剂U0126及抗氧化剂NAC预处理1h对高糖高脂刺激THP-1细胞产生MV含量的变化。2.采用Western Blot技术检测高糖高脂处理2小时、4小时、6小时后MAPK通路中p-ERK、ERK、p-p38、p38蛋白表达的变化。3.采用流式细胞仪检测高糖高脂处理20小时后细胞凋亡率的变化及高糖高脂处理不同时间后细胞内ROS的变化。结果：1. ELISA结果显示：与对照组相比,30mM葡萄糖与25μg/mL ox-LDL刺激THP-1细胞20小时后MV产生显著增多(P<0.01)；抗氧化剂NAC预处理1h后高糖+NAC组MV含量明显低于高糖组(P<0.01),高脂+NAC组MV含量也明显低于高脂组(P<0.01)；ERK抑制剂U0126预处理1h后高糖+U0126组MV含量与高糖组无明显变化(P>0.05),高脂+U0126组MV含量与高脂组也无明显变化(P>0.05)。2. Western Blot结果显示：与对照组相比,随高糖刺激时间延长ERK、p38蛋白磷酸化水平均明显升高(P<0.01)。其中,p38蛋白的磷酸化,在4h作用最强。与对照组相比,高脂刺激4h后ERK蛋白磷酸化水平明显升高(P<0.01)；对于p38蛋白的磷酸化,高脂刺激2h、4h后均有增加(P<0.01)。其中,对于ERK蛋白的磷酸化,在4h作用最强；对p38蛋白的磷酸化,则在2h作用最强,而后随时间延长4h(P<0.01)、6h(P>0.05)逐渐减少。3.流式细胞仪检测细胞凋亡率：与对照组相比,30mM葡萄糖与25μg/mL ox-LDL处理20小时后,细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。4.流式细胞仪检测细胞内ROS结果：30mM葡萄糖刺激THP-1细胞2h后,ROS的产生达高峰,达对照组的约3倍,而后随时间的延长呈逐步递减趋势,至24h均高于对照组(P<0.01),在48h回落至基线水平。25μg/ml ox-LDL刺激THP-1细胞2h,ROS的产生达到高峰,约为对照组7倍,而后随时间的延长呈逐步递减趋势,至24h均高于对照组(P<0.01),在48h回落至基线水平。结论：1.高糖高脂刺激单核细胞THP-1后能显著增加MV的产生2.高糖高脂提高氧化应激途径刺激THP-1细胞产生MV,伴随着细胞凋亡的发生。3.高糖高脂刺激THP-1细胞可以活化ERK/MAPK和p38/MAPK通路。