研究目的骨折修复是一个多阶段、复杂的过程,其最终目的是恢复功能和生物力学状态。骨折可立即切断局部血管,形成血肿,导致低氧分压和局部缺氧。骨再生效果总是受到包括TNF-α、IL-6等在内的高水平炎性细胞因子的影响。目前关于IL-6在骨生成中的功能作用的研究尚未达成一致结论。IL-6促进成骨分化及骨折愈合和抑制成骨分化及抑制骨折愈合均有报道。欲探究IL-6对成骨细胞的双向作用可能存在的机制。研究方法在本研究中,我们用200ng/ml BMP-2培养C2C12细胞,来诱导其为成骨细胞。在此基础上分别把TNF-α或IL-6(浓度分别为0.1,1.0,10和100ng/ml)添加至含有BMP-2的培养基(200ng/ml)中培养C2C12细胞。在第7天进行茜素红S染色和ALP染色,并检测ALP活性,Runx2 m RNA,Collagen1A2 m RNA和骨钙蛋白的表达。将TNF-α组作为参照,来确定IL-6所发挥的效应。为了检测TNF-α和IL-6是否可逆转BMP-2诱导的成骨细胞分化。在使用BMP-2连续处理细胞7天后,除去BMP-2。同时,将浓度为100 ng/ml的TNF-α和IL-6分别加到细胞培养基中三天。连续三天进行茜素红染色、ALP染色,并检测ALP活性和Runx2 m RNA的表达。研究结果低浓度的TNF-α(小于1ng/ml)可以促进C2C12的成骨分化,高浓度的TNF-α则抑制成骨细胞分化。然而,本实验模型中,不同浓度IL-6均能促进stat3的核内转运,而且stat3在核中的表达与Runx2的水平呈负相关。两种炎症因子都能逆转BMP-2诱导的成骨细胞分化。研究结论不同浓度下,IL-6对C2C12细胞的成骨分化一直起抑制作用,是通过促进stat3向核内转移来实现的。至于有文献报道的IL-6对成骨细胞的促进作用,可以确定跟IL-6的浓度无关。