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一研究背景骨髓炎骨缺损(Osteomyelitic bone defection,OBD)对于病人来说是相当痛苦的,其治疗对于医生来说也是非常棘手的,有很多患有此病的患者最后不得不截肢。其治疗主要是抗感染和骨缺损的修复,近年来,出现了大量有关转移局部带血供肌瓣(Muscleflap with vessel pedicle,MFVP)修复骨缺损的报道,也有转移以腺病毒为载体表达的骨形态发生蛋白-2(Adenovirus Recombined Human Bone Morphogenetic Protein-2,Ad-rhBMP-2)基因诱导肌细胞成骨的报道,但尚未发现有关于转移肌瓣骨化过程及转移Ad-rhBMP-2基因修复OBD的报道。我们应用显微外科技术,转移局部带血管蒂肌瓣骨化修复OBD,并联合应用基因技术,缩短肌瓣骨化修复OBD时间,提出治疗OBD有效的新方法。二实验目的观察、比较两种治疗方案诱导肌瓣骨化修复OBD的效果。①应用显微外科技术,转移MFVP填充清创术后的OBD,保证肌瓣的血供。②联合应用显微外科技术与基因技术,转移MFVP填充清创术后的OBD,并转移Ad-rhBMP-2基因至肌瓣。三实验方法(一)大鼠OBD模型制备:向胫骨上段骨缺损腔内塞入蘸有3×10~6CFU金葡菌0.3 ml的纱布及注射5%鱼肝油酸钠(Sodium Morrhuate SM)注射液(含有2%苯甲醇),以骨蜡封闭骨面,14天后,造成骨髓炎骨缺损模型。(二)治疗OBD1分组:将120只Wistar大鼠OBD模型随机分为3组,每组40只:第1组,对照组;第2组,肌瓣组;第3组,复合转移Ad-rhBMP-2组。2清创:清除不健康的软组织及坏死的骨组织,保留感染骨质,钻通封闭的髓腔。3实验过程:第1组:膝下愿切口进入,适当延长,清创后,缝合创口。第2组:取膝下切口,局部清创。更换手套及操作器械,自腹股沟中点向上方做“S”形切口,长约4cm,应用显微外科技术,自股动脉起始处找到向上走行的腹壁浅血管神经束,保留肌肉深层,游离血管神经蒂,宽4-5mm,及以腹壁浅血管、神经为蒂的肌瓣(Muscle flap with epigastria superficialis vessel pedicle,MFSAVP),并在与股动脉神经束交界处切断神经束。上下口之间做皮下潜行隧道,将肌瓣经隧道穿至下方的清创口,将肌瓣填充残腔,缝合创口。第3组:第一步:清创及转移肌瓣,同第2组;第二步:在肌瓣上分3点局部注射Ad-rhBMP-2,注意不损害肌瓣血供,缝合创口。4术后处理:3天内给予肌肉注射盐酸罂粟碱预防血管痉挛,按(10mg/kg/d),肌肉注射注射用头孢呋辛(按100mg/kg/d)抗感染知道伤口愈合。并分别在术后7、14、28、42、56天时,测量肛温、检验白细胞分析,以断髓法处死8只大鼠,观察大鼠肌瓣,检查胫骨CR,光镜下观察肌瓣组织病理切片,观测成骨情况。四实验结果(一)模型体重、肛温、局部表现、CR及光镜下所见病理图片示:7天时,骨髓炎急性期,7天后,症状逐渐缓解,14天时,骨髓炎转为慢性期,制造出OBD模型。(二)治疗第1组伤口愈合时间,比第2、3组时间长。第1组,术后56天时,残腔变小为原来体积的1/2,瘢痕填充缺损腔。第2组:术后56天时,肌瓣骨化,修复OBD。第3组,术后42天时,肌瓣骨化,修复OBD。五结论(一)将蘸有3×10~6CFU金黄色葡萄球菌的棉条植入Wistar大鼠胫骨上段骨缺损腔内,并腔内注射5%鱼肝油酸钠,骨蜡封闭,可以造成OBD模型。(二)将蘸有3×10~6CFU金黄色葡萄球菌的棉条植入Wistar大鼠胫骨上段骨缺损腔内,并腔内注射5%鱼肝油酸钠,骨蜡封闭,7天时,骨髓炎处于急性期;经过应用抗生素7天,骨髓炎转为慢性。(三)骨髓炎骨缺损区骨质直径(d),骨缺损面积(m),当m＞d×1.5d时,骨髓炎骨缺损很难自愈。(四)转移局部带血管蒂肌瓣,肌瓣可以骨化修复骨髓炎骨缺损。(五)Ⅳ途径转移5×10~8PFU/ml滴度的Ad-rhBMP-2诱导肌瓣骨化过程中,无明显排异反应。(六)Ⅳ途径转移Ad-rhBMP-2至肌瓣,可以诱导肌瓣骨化修复骨髓炎骨缺损。(七)当转移带血管蒂肌瓣修复骨髓炎骨缺损时,Ad-rhBMP-2可以缩短肌瓣骨化时间。