目的:在细胞水平上,心肌损伤状态下,观察富含于脑组织中的Ras同源物(Ras homologue enriched in brain,Rheb)活性改变对H9C2心肌细胞自噬的影响。方法:使用异丙肾上腺素(ISO)处理心肌细胞的方法,检测心肌损伤标记物的变化,建立心肌细胞损伤模型;损伤标记物包括:ANP(atrial natriuretic peptide,心房钠尿肽)、BNP(brain natriuretic peptide,脑利钠肽)、α-MHC(α-myosin heavy chain,肌球蛋白重链α)、β-MHC(β-myosin heavy chain,肌球蛋白重链β);使用Rheb特异性小干扰RNA抑制心肌细胞中Rheb基因的表达,通过实时定量荧光聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测心肌损伤标记物的变化;通过蛋白印迹(Western Blot)及细胞免疫荧光方法检测自噬相关蛋白LC3(microtubule-associated protein 1 light chain 3-β,微管相关蛋白1轻链3-β,简称LC3)的表达;用Annexin V/PI双染法通过流式细胞仪及Western Blot检测细胞凋亡水平。结果:在H9C2心肌细胞中,使用100μmol/L异丙肾上腺素处理细胞24小时后,损伤指标BNP水平明显升高;在用异丙肾上腺素处理细胞后建立的心肌损伤模型中,通过Rheb特异性小干扰RNA抑制Rheb基因表达后,心肌肥大损伤标记物BNP有下降的趋势,自噬相关蛋白LC3水平明显增强,凋亡水平无明显变化。结论:在细胞水平上,Rheb活性下降可使细胞自噬增强;当心肌细胞受到损伤时,降低Rheb活性可通过增强自噬,对心脏起到保护作用。