论文部分内容阅读
本文首先在酵母中发现MINT与AlphaA-CRYBP1存在相互作用,进而通过体外的GST-pull down和体内免疫共沉淀及哺乳动物双杂交分析进一步证实MINT与AlphaA-CRYBP1之间确实存在物理的相互作用。同时通过ChIP和EMSA实验证明了MINT和AlphaA-CRYBP1可以以复合物的形式结合于Ⅱ型胶原基因的增强子序列上。以上结果提示我们MINT可能通过AlphaA-CRYBP1参与Ⅱ型胶原的表达调控。最后我们通过构建报告基因系统,在软骨细胞和非软骨细胞中证明了,MINT或其C段可以通过CRYBP1抑制Ⅱ型胶原基因的增强子的转录激活活性,并且这种抑制作用表现为HDAC依赖性。结果说明:MINT通过募集HDAC,参与了CRYBP1所介导的对Ⅱ型胶原基因的转录抑制,进而可能参与软骨发育的调控。
本研究首次发现转录因子AlphaA-CRYBP1与MINT存在相互作用,并且能以复合物的形式结合于Ⅱ型胶原基因的增强子序列上。并进一步证明了这种相互作用在体内的功能是抑制Ⅱ型胶原基因的转录。这些结果对于我们深入了解软骨及骨发育的分子机制有重要的理论意义。