埃氏巨球形菌发酵生产丙烯酸研究

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丙烯酸(CH2=CHCOOH),是工业生产中重要的不饱和有机酸,也是重要的有机化工原料。它主要用于制备丙烯酸树脂及其它有机合成,另外也用于粘合剂、涂料、化纤、皮革、造纸、纺织工业和光敏树脂板等的生产。今后几年,我国在高吸水树脂、丙烯酸酯、特种丙烯酸酯以及油田领域对丙烯酸的需求都会逐年增加。工业法生产丙烯酸的合成原料基本来自石油提炼所获得的产品,随着石油资源供应日趋紧张,发酵法生产丙烯酸,越来越受到研究人员的重视。本项目通过系统分析微生物在葡萄糖培养基上产丙烯酸的代谢途径,通过代谢调控的手段,分析细胞代谢通量,添加甲萘醌等电子受体和阻断剂发酵生产丙烯酸,降低生产成本,提高丙烯酸产量。主要工作如下:1.本文以埃氏巨球形菌(Megasphaera elsdenii)为出发菌株,对原始菌株进行了理化诱变及抗性突变,获得一株高抗酸性的菌株,其产丙烯酸量达6.46 mmol/L,是诱变前的1.85倍。2.通过研究培养基成分和培养条件对产丙烯酸的影响,并对其进行优化,得到了最佳产丙烯酸培养基为:KH2PO4(0.5 g/L),NH4Cl(0.5g/L),MgCl2·6H2O(0.3g/L),可溶性淀粉(20.0 g/L),葡萄糖(13.0g/L),酵母提取物(4.0g/L)。3.通过研究培养条件对产丙烯酸的影响,并对其进行优化,得到了最佳培养条件为:接种量10%,装液量20%,37℃,pH 7.5,120 rpm,72 h。4.通过探讨阻断剂和电子受体对菌株产丙烯酸的影响,确定了最佳添加物及条件为:0.015%(v/v)甲萘醌,0.15%的3-丁炔酸,pH 7.5,温度37℃,反应72h,丙烯酸产量为8.96 mmol/L。
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