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三磷酸腺苷（ATP）是生物代谢过程的能量载体，反映线粒体能量生成及利用的重要指标。活性氧（ROS）是生理过程必要的代谢产物，一旦过量会引起机体损伤、细胞凋亡。ATP和ROS是线粒体氧化磷酸化过程的同步产物，同时测定细胞或组织内两者的水平对评价生命体的生理功能具有重要意义。顺序注射-阀上实验室-化学发光系统具有自动化、微型化程度高、稳定性好、分析速度快、样品/试剂消耗量低的特点，也兼具化学发光法灵敏度高的优点。基于此，本文以同时测定ATP和ROS为目标，开展了以下工作：1．顺序注射-阀上实验室-化学发光法同步检测ATP和ROS在SIA-LOV系统内，分别优化了Luminol化学发光法测定ROS和荧光虫素酶生物发光法测定ATP的各项参数，并评价了分别测定时的分析性能。在此基础上，重点考察了ROS和ATP共存时分别测定的影响因素、灵敏度和选择性。构建了ATP和ROS同步测定的顺序注射-阀上实验室-化学发光新方法，并将其应用于张氏肝细胞中ATP和ROS的测定。结果表明：SIA-LOV-CL测定ATP和ROS不仅具有较高灵敏度和较宽线性范围，而且试剂试样消耗显著降低。对于ATP和ROS的绝对检出量分别达到6.810-15mol和810-15mol；在最优条件下，一定浓度ATP和ROS共存时互不干扰，能够实现ATP和ROS的同步检测，且精密度较高，相对标准偏差RSD分别为2.3%(5nmol·L-1ATP)和4.6%(100nmol·L-1ROS)；将该方法应用于张氏肝细胞中ATP和ROS的同时测定，得到了满意的结果，ATP回收率在99%-104%，ROS的回收率在99%-104%。2．植物叶片ATP和ROS同步测定重点考察了同步测定植物叶片中ATP和ROS的样品前处理方法，包括提取剂的选择、提取液中干扰组分的消除，并评价了ATP和ROS水平与植物生长发育状况的相关性。结果表明：三氯乙酸（TCA）可以作为植物叶片ATP和ROS共同提取剂；与介孔材料CMK-3和炭黑XC-72相比，聚乙烯吡咯烷酮（PVP）可以有效消除多酚对测定的干扰；对同一株植物上的新叶、中叶和老叶的ATP和ROS同步测定结果显示，ATP和ROS水平与植物生长状况相关，ATP的含量老叶<新叶<中叶，ROS却表现出中叶<新叶<老叶。