论文部分内容阅读
T-2毒素是单端孢霉倍半萜烯族毒素中毒性最强的真菌毒素,主要由镰孢菌属代谢产生,在全世界已被公认为谷物中不可避免的强毒性污染物,能够导致人类和畜禽亚致死性中毒,甚至是致死性中毒。用于饲喂动物的食品加工副产品和制作饲料的谷物原料常被检测出含有高浓度T-2毒素和HT-2毒素。T-2毒素具有显著的生殖毒性,饲料中低剂量的T-2毒素就可以显著影响青年母牛和母羊的卵巢功能,造成一系列的生殖危害,影响畜牧生产进程。T-2毒素对妊娠动物的生殖毒性损伤更为严重,可导致胚胎丢失、流产、胎儿畸形、胎盘和生殖道病理性出血,极大地影响动物的繁殖性能。本试验首先观察对T-2毒素导致的子宫组织学损伤和对胚胎着床的影响,进一步通过荧光定量PCR、Western Bolt等方法检测了T-2毒素对小鼠原代子宫内膜基质细胞凋亡和炎症因子表达的影响。试验主要结果如下:1.使用不同浓度的T-2毒素(0,0.34 mg/kg,1.5 mg/kg,3.0 mg/kg)处理孕4 d小鼠,尾静脉注射台盼蓝检测对胚胎着床的影响。结果显示,T-2毒素能够显著减少胚胎着床数,影响胚胎着床位点的分布,导致子宫两侧胚胎分布不均匀,胚胎间隔距离存在显著差异,呈剂量依赖性。2.T-2毒素处理孕4 d小鼠,在孕6 d取小鼠子宫HE染色观察,低剂量能够引起基质、蜕膜化细胞减少,嗜酸性细胞间质增多,炎性细胞浸润,特别是出现中性粒细胞;高剂量T-2毒素处理引起基质细胞极显著减少,蜕膜化区域几乎不可见,细胞排列紊乱,大量炎性细胞浸润,部分子宫腔上皮细胞脱落,子宫组织结构不完整,子宫腔内出现大量嗜酸性细胞间质、炎性细胞、红细胞组成的细胞团块。3.T-2毒素作用于原代基质细胞诱导细胞凋亡,引起凋亡相关基因caspase-3、Cleaved caspase-3表达增加,Bcl-2/Bax降低。4.T-2毒素作用于原代基质细胞引起炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α和COX-2的表达量极显著升高,激活两条炎症信号通路即NF-κB炎症信号通路和JNK炎症信号通路;T-2毒素作用于蜕膜化基质细胞引起炎症因子异常表达,炎症信号通路下游的蜕膜化功能基因的表达异常。