论文部分内容阅读
氧化还原敏感型药物传递系统在控制释放方面具有十分重要的意义,本课题在姜黄素(Cur)单端引入一个具有还原敏感性质的二硫键(-SS-),制备出一种含-SS-的姜黄素衍生物(Cur-SS-COOH),再通过脱水缩合的方法将该姜黄素衍生物与双亲性二嵌段共聚物聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-PLA)化学键合,成功合成了一种具有氧化还原敏感特性的姜黄素前药胶束单体mPEG-PLA-SS-Cur,并通过透析的方法使其在水中自组装形成一种具有还原敏感性质的姜黄素胶束。与此同时,本实验还成功合成了非还原敏感型姜黄素前药胶束单体mPEG-PLA-Cur作为对照品,进而制备了非还原敏感性质的姜黄素胶束。通过对比两种姜黄素前药胶束在较强还原环境下(含10 mM二硫苏糖醇(DTT))的释药行为来验证mPEG-PLA-SS-Cur的还原响应性能。本课题采用1H NMR及13C NMR等手段证实了两种聚合物单体的成功合成,并根据1H NMR峰面积计算得到mPEG-PLA-SS-Cur和mPEG-PLA-Cur聚合物单体中姜黄素接枝率分别为89%和66%。通过芘荧光探针法,测得两种姜黄素聚合物胶束的临界胶束浓度(CMC)分别为6.74±0.36和7.13±0.94μg/mL。本课题采用动态光散射仪(DLS)对各胶束粒子的粒径进行测定,mPEG-PLA-SS-Cur和mPEG-PLA-Cur两种胶束粒径分别为115.60±5.89和102.87±2.50 nm。通过透射电子显微镜(TEM)对各胶束外观形貌进行观察,结果显示,两种胶束均呈圆球形均匀分布,大小均一,具有良好的分散性。本文根据1H NMR的积分面积计算出mPEG-PLA-SS-Cur和mPEG-PLA-Cur两种胶束载药量分别为8.22%和5.81%。本课题在模拟癌细胞内还原环境下(含10 mM DTT)进行了药物释放研究,结果显示,mPEG-PLA-SS-Cur的累积药物释放量(48.57±3.30%)显著高于mPEG-PLA-Cur(16.12±2.72%),其释放速度也明显快于mPEG-PLA-Cur。此结果充分证明了胶束中二硫键具有还原敏感的性质,还原环境可触发药物的快速释放。本课题选用人宫颈癌细胞(HeLa细胞)来对两种胶束的细胞毒性和细胞摄取能力进行了考察。细胞毒性研究发现还原敏感型胶束(IC50=4.38±0.34μM)较非还原敏感型胶束(IC50=9.87±0.59μM)具有更大的细胞毒性。细胞摄取实验结果显示还原敏感型胶束细胞摄取能力强于非还原敏感型胶束。从细胞摄取荧光图上可以看出,在进入细胞以后,姜黄素主要分布于HeLa细胞的细胞质和细胞膜上。综上所述,本课题成功合成了一种还原敏感型姜黄素聚合物胶束并对其进行了一系列性质研究,其有望成为新的抗肿瘤药物控制释放载体,在抗癌药物递送系统中具有非常广阔的应用前景。