论文部分内容阅读
真核生物基因表达调控是分子生物学的研究热点之一。植物基因的表达受启动子的控制，高效表达启动子的分离及功能分析不仅是植物基因工程研究的重要方面，也是表达调控研究的重要内容。
本文根据EST数据克隆了一个预测在水稻茎中高效表达的启动子Os252和两个预测在水稻胚乳中高效表达的启动子Os772及Os359。将这三个启动子与GUS基因构建成表达载体。然后采用农杆菌介导法转化水稻粳稻品种日本晴(O．sativa japonica)，分析这些启动子的组织特异性以及启动基因表达强度。
转基因水稻GUS染色及PCR鉴定结果表明，GUS基因已经成功地整合进水稻基因组中。GUS组织化学分析表明，Os252能启动GUS基因在水稻叶、茎以及胚乳中表达，而Os772和Os359能启动GUS基因在水稻胚乳中表达但不能在叶子和茎中表达。进一步GUS酶活性的测定表明，叶和胚乳中Os252启动子活性分别是35S启动子的1.9和2.5倍，而Os772和Os359启动子在各组织中的酶活性相对较低。由于这些启动子都来自于水稻，具有可靠的安全性。Os252启动子在叶和胚乳中的活性高于35S启动子，因此该启动子可望用于水稻基因工程研究。