癌症是人类疾病中仅次于心血管疾病的第二大杀手，严重威胁着人们的生命健康和安全。在我国癌症发病率正呈现出逐年增加的趋势，并且越来越年轻化。肝癌在我国的死亡率居所有恶性肿瘤第二位，目前，对于肝癌的治疗主要以手术切除、化疗和放疗为常用治疗方式，其中手术切除对于早期患者来说是可行的，但是对于大多数患者是不现实的，尤其是肝癌晚期，传统的治疗方法已难以奏效，迫切需要新的技术来提高患者的生活质量和生存率。基于癌症的靶向基因-病毒治疗（targeting gene-virotherapy)的策略，以病毒为载体联合基因治疗和病毒治疗的优势，为肿瘤治疗带来了新的希望。高尔基体驻膜糖蛋白（GP73）是近年发现的一种糖蛋白。研究发现，GP73是一种很好的肝癌标志物，其灵敏性和特异性均高于传统肝癌标记物AFP，分别达到75%和97%，而AFP仅为58%和85%。基于这一特性，本论文首先克隆了GP73启动子序列，通过Dual-Luciferase双荧光报告系统，对其活性进行了检测，筛选出较高启动子活性的659bp核心序列。随后，基于Adeasy腺病毒系统和课题组现有溶瘤腺病毒ZD55，我们将腺病毒内源型E1A启动子替换成GP73启动子，构建了肝癌特异GP73启动子调控E1A区并删除E1B55kDa和E3区的选择性复制型溶瘤腺病毒GD55，以及携带EGFP绿色荧光蛋白的腺病毒GD55-EGFP。体外实验结果表明，GD55系统较ZD55系统具有良好的肝癌特异性增殖能力，显示了其靶向性杀伤肝癌细胞生长的效应，并且对肝正常细胞的毒性较小；进一步的体内裸鼠实验表明，GD55比ZD55具有更好的抗肝癌移植瘤生长的作用。总之，本研究成功筛选出具有肝癌特异性的GP73启动子核心区，并且构建了肝癌靶向溶瘤腺病毒载体GD55，初步实验表明其具有较好的肝癌特异性，可以作为肝癌的靶向基因-病毒个性化治疗策略，为以后临床肝癌个性化治疗奠定基础。