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WHO的全球流行病学调查表明肠道病毒属的柯萨奇病毒B（CVB）是引起人类心血管病变的第一位的病毒；自50年代起陆续的研究资料也证实在病因学上CVB3与病毒性心肌炎、扩张型心肌病显著相关。现有的对CVB3致病机制的认识主要反映于病毒急性感染时的直接细胞毒杀伤效应，及亚急性、慢性期（包括潜伏状态）由其介导的持续的免疫病理反应；但对于完整的致病机制的理解还有很长的路要走。根据已知理论提出的多种治疗手段，如传统的核苷类似物化学修饰、细胞因子、免疫抑制剂、反义核酸等治疗还不尽如人意，目前临床上仍缺乏有效的抗CVB3药物。甘草作为众约之王，味甘，性平，作用趋向即归经于心、肺、脾、胃，具清热解毒、补中益气功效。现代研究表明其主要活性成分甘草酸具有广谱抗病毒，尤其是对免疫的双向调节功效。我们基于甘草酸的传统理论及生物功能的研究进展，试行甘草酸体内抗CVB3急性病毒性心肌炎的可行性研 浙江大学医学院硕士论文 甘草酸抗病毒性心肌炎动物实验研究 究。 本实验利用柯萨奇病毒B3／N。lCy株（滴定IOgo TCID。0／olml＝－13） 建立小鼠病毒性心肌炎模型，所用小鼠为心肌炎易感鼠系BALB儿 雄鼠， 共269只，10．17士1刀7g；实验按以下流程设计： 1．测定病毒株BALB儿鼠体内LDS。，构建CVB3体内急性感染实验模型； 2．测定甘草酸SALB／。鼠体内L＊；。： 3．正交设计以中位生存时间（MSD）为指标，选择甘草酸剂量、作用时 机、疗程； 4．甘草酸治疗剂量体内抗病毒，设立阳性对照病毒哇组，空白对照织； 5．甘草酸根据病毒感染时机分为感染前、感染时、感染后治疗，广分折 比较： 6．甘草酸最大实验剂量 100Ug吃治疗 K Ph观测毒副作川； 实验小鼠计算 MSD、生存率；体外单层细胞培养细胞病变效应（CPE） 法滴定 TC！D50；常规苏木精一伊红染色（HE）法病理观察：生化酶谱比 色法检测＊OH：心肌组织＊＊A常规抽提，经扩增后琼脂糖电泳检测病毒 核酸。整合分析甘草酸体内抗病毒疗效的各指标权重，确定综合抗病毒指 数，建立量效反应方程。结果： 1．C＊B3 LO；。一21呛］。＊m0；。川．lml：致死剂量病毒攻击实验鼠后，心 肌病理见典型的心肌炎表现：炎症、变性坏死、单核淋巳细胞浸润， 中位生存时间（MSD）＝4．l！大，log；。TCID。。／mg与 LDH了第 3大 达高峰，分别10．018士0．382与303．75土23．55U／d！，随后进行性减低， 第12叫 大达4．85土0．35与116．75土1885U／d；心肌组织炳海滴役显 著高于脾、肾、胰，而脾、肾、胰之间无差异；心肌RNA持续阳性； 2．甘草酸LDS。＝14石gmg／10g：正交设计选取因于水平：甘草酸剂量 100Ug乍；治疗7天；感染后1天即治疗最延长MSD，而病毒种量10LD50 MSD最低；方差分析甘草酸剂量 50Ug哈与 100fig屹无差异； 2 浙江大学医学院硕士论文 甘草酸抗病毒性心肌炎动物实验研究 3．甘草酸 50Ug乍与 100Ug屹剂量治疗组与病毒吟治疗组的各指标对照， 甘草酸组无一死亡，MSD＝ZI无，病理炎症坏死、免疫细胞浸润减轻， RNA阴性，观测期末IOgl。TCIDS。／sg、LDH均显著降低（2．4士0．4、 1．7士0．3 vs 4．9士0．2： 80．5土8．4 u／dl、72．0士9石 u／d vs 108．2士15．0 U／dl），与病毒哇治疗呈明显差异：病毒哇治疗基本无效。但甘草酸 50Ug乍与］00［ig乍治疗组间无差异。 4．甘草酸50Ug屹与100tlg乍剂量治疗组分别在感染前、中、后的给药， 各指标的分别对比均提示100U旮g、感染前3大治疗最佳，而50U分g、 感染后3大治疗指标改善最不显著。 5．甘草酸100fig屹 长期观测组30大未发现毒副作用表型。 6．各指标权重系数分别为MSD：－1．28；生存数：－l工6；死亡数：080； ＊CI比。：0．79；L＊N：0．66；＊NA：0．28：建立甘草酸抗CVS；练合 指数；对应于感染组，100Ug乍组指数2刀9土0．27。 根据上述结果，本研究取得以下结论： 1．CVB3／N3llCy株对BALB儿鼠实验造模形成急性病毒性心肌炎发作： 2．甘