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Pod1基因在哺乳动物的性别分化、性腺发育、组织器官发生以及机体免疫等方面都有重要的作用，但是，在非哺乳脊椎动物发育过程中Pod1基因可能具有的调控功能目前却尚不清楚。而制备高效价、高纯度、高特异性的抗体是研究基因及其蛋白质产物功能的首要前提。目前，尚未见有关Pod1基因抗体制备及其在非哺乳脊椎动物组织中免疫定位的文献报道。本研究以青鳉为实验材料，获得的主要结果如下: 1.将已正确测序的青鳉Pod1基因翻译成多肽序列，利用生物软件从中筛选出最适合作为抗原的片段进行合成，经过HPLC和质谱的纯化和检测后，显示合成的多肽分子量为1774.00D，与理论值相符合。 2.将合成多肽与KLH偶联后作为抗原去免疫新西兰大白兔，制备了Pod1基因的多克隆抗体并进行纯化，SDS-PAGE检测结果显示多克隆抗体基本上只有轻链（大小约25kD）和重链（大小约55kD）两个条带，纯化效果良好;间接ELISA测得纯化后的抗体效价为1∶512000; Western Blot结果显示多克隆抗体可特异性识别组织上相对分子质量约为18kD的蛋白质，符合理论值。 3.利用Image J对Western Blot中各组织蛋白及内参GAPDH的条带进行灰度分析，然后利用Excel与Sigma Plot把相应的结果用软件转换成直观的柱形图，结果表明POD1蛋白在肝脏中的表达含量最高，其次是卵巢，肠中的表达量最少。 4.利用免疫组化和免疫荧光对POD1蛋白产物进行组织定位研究，结果显示POD1蛋白主要表达部位为:肝组织的中央静脉附近、肝板和肝血窦;肠组织中的黏膜上皮细胞和肠壁;肌肉组织中的肌细胞细胞核;Ⅳ期卵母细胞的细胞质和细胞膜尤其在卵黄核附近;Ⅶ期卵母细胞膜的颗粒细胞层、卵泡膜附近尤其是卵黄球出现的部位;Ⅸ期卵母细胞膜的颗粒细胞层和卵黄块中;精巢的细胞膜、输精管的上皮细胞附近及支持细胞细胞核上。 总之，本研究首次成功制备出了青鳉Pod1基因的多克隆抗体，并通过免疫组化和免疫荧光研究了POD1蛋白产物在青鳉组织中的分布，结果表明，Pod1基因在青鳉免疫防御、性腺等器官发育过程中具有重要作用，为进一步研究Pod1基因在鱼类免疫防御和组织发育过程中的功能和作用机理提供了依据。