冰糖脐橙橙皮苷的分离纯化及发酵型果汁研究

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以冰糖脐橙皮为原料,采用纤维素酶、微波、纤维素酶-微波结合方法进行橙皮苷的提取、分离、纯化的系统研究,并以冰糖脐橙果汁为原料进行乳酸菌发酵饮料研制。主要结果如下:(1)采用单因素试验和正交试验方法,对橙皮苷的提取工艺进行了优化研究。先分别用纤维素酶解法和微波提取法对橙皮苷进行了单独提取,然后采用纤维素酶-微波法结合提取方法,对提取条件进行了探讨。最终得出的较优工艺条件为:纤维素粗酶用量3%(以原料干质量计),pH 5.5,酶解时间90 min,酶解温度45℃,微波功率560 W,微波时间25 s,料液比1:50,乙醇体积分数80%。在此条件下,橙皮苷提取率高达6.41%,相对标准偏差RSD=0.39%(n=3),说明该工艺稳定可行。在最佳提取条件下制备的总固形物中,橙皮苷的含量为16.18%。(2)大孔吸附树脂对粗提物进行纯化,探讨七种树脂(型号分别为:AB-8、D-151、S-8、HP-20、HPD-500、HPD-600、H-103)对橙皮苷吸附解析效果的影响.确定AB-8型大孔吸附树脂为最佳纯化树脂。用该树脂对粗提物进行进一步动态吸附纯化,试验得出AB-8型大孔吸附树脂最大吸附量为12.02 mg/g。采用单因素试验方法,得出适宜的纯化条件为:上样液pH值为4.5,上样液流速为60 mL/h,上样液浓度为9 mg/mL,洗脱流速为60 mL/h,洗脱液体积为3倍柱体积,洗脱液浓度为80%。纯化后的橙皮苷样品,纯度从粗提物的16.18%提高到33.33%,相对标准偏差RSD=3.775%(n=5),精制倍数2.06倍。(3)采用高效液相色谱法对纯化产物做进一步含量测定,橙皮苷对照品的HPLC标准曲线方程为:y=22.599x+5.534,R2=0.9985,橙皮苷进样量在0.832-4.160μg范围内线性关系良好。测定纯化产物含量,根据标准曲线方程计算,橙皮苷纯度超过30%。(4)以冰糖脐橙果肉为主要原料,开发研制乳酸菌发酵饮料,采用四因素三水平正交试验,确定发酵液配方、发酵条件及发酵饮料调配的最佳工艺参数。结果表明:适宜的发酵液配方为:脱脂乳量为4%,葡萄糖量为2%;最佳发酵条件为:接种量4%,发酵温度42℃,发酵时间36 h;发酵饮料调配的最佳配方为:4%蔗糖、0.04%柠檬酸和0.2%羧甲基纤维素钠。饮料终产品,外观均一、稳定,口感酸甜适中,风味独特,产品乳酸量为0.75%,乳酸菌数为1.8×106个/mL。
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