温度对江黄颡鱼(Pseudobagrus vachelli)性分化的研究

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本文采用组织学方法观察了江黄颡鱼(Pseudobagrus vachelli)原始生殖细胞(PGCs)的迁移、生殖嵴生成和性腺分化;用免疫组织化学方法,检测了对照组和各实验组鱼苗的脑和性腺组织的芳香化酶活性;以及用RT—PCR的方法,检测芳香化酶基因在脑、性腺、胃肠、肝脏、肾脏的表达情况,探讨温度对芳香化酶基因表达的影响。实验结果显示,1日龄仔鱼PGCs位于鱼体中肠背方的脏壁中胚层中;5日龄时PGCs迁移到背方的腹膜上皮;8日龄时生殖嵴形成;14日龄时原始性腺形成;23日龄性腺开始分化。从孵化后的第10d开始,分别用不同水温(20±0.5℃、24±1.0℃、30±0.5℃、32±0.5℃、34±0.5℃)培育仔鱼达25d。实验结束后统计幼鱼性比和雄性率。对照组(24±1.0℃)和20±0.5℃、32±0.5℃实验组的雌、雄性比接近1:1(分别为1:1.09、1.22:1和0.99:1);30±0.5℃实验组的为1:4.89,雄性率达83.3±0.7%;34±0.5℃实验组的为2.85:1,雄性率仅为26.4±0.4%。30±0.5℃可使幼鱼性腺分化趋向雄性化,34±0.5℃则使幼鱼性腺分化趋向雌性化。芳香化酶主要定位于鱼的脑组织、卵巢中的卵原细胞和滤泡细胞,以及精巢的间质中。无论是对照组或实验组,在性分化前稚鱼在此时已有微弱的芳香化酶表达。随着性分化进程,芳香化酶的表达逐渐增强。在30±0.5℃高温组,芳香化酶活性较弱,而在34±0.5℃高温组,芳香化酶活性较强。性腺分化后,卵巢的芳香化酶活性比精巢的强。P450aromA的表达仅局限在卵巢;而P450aromB在脑、性腺、胃肠、肾组织中均有表达,其中脑的表达量较高。在卵巢中P450aromA的表达量是P450aromB的约2.2倍。
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