抗副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)不耐热溶血素GFP荧抗体(绿色荧光蛋白融合抗体)的表达、纯化及晶体结构研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lindan1982
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抗体以其高亲和、特异性结合抗原的特性,广泛应用于治疗和检测。基因重组和蛋白工程技术改造产生了多种具有新特点、新功能的基因工程抗体,如单链抗体、重链抗体、双功能抗体、嵌合抗体等等。它们可以极大地缩小抗体的大小,增强特异性,扩大其应用范围。GFP荧抗体(绿色荧光蛋白融合抗体)是经基因重组技术把绿色荧光蛋白(GFP)和抗体的片段融合在一起形成的一种同时具有抗体的特异结合性和GFP荧光的生物分子。一般抗体用于检测都需要进行标记或利用抗此抗体的二抗来测定,而GFP荧抗体设计思路是让一个蛋白分子既有特异结合抗原的特性又能很容易的直接被检测到,从而不需要标记或使用二抗。  本论文表达制备了抗副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)不耐热溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)的GFP荧抗体,并经纯化、结晶及X-ray衍射对其三维晶体结构进行了研究。副溶血性弧菌是食源性革兰氏阴性嗜盐菌,能引起致命的食源性疾病,严重威胁着人类和动物的健康。TLH是的这种致病菌产生的一种细菌毒素。这种细菌毒素的检测对人民群众的健康及食品安全具有重要意义。本论文通过结构研究建立的GFP荧抗体分子模型,在分子水平上,为新一代抗体的开发和研究提供理论基础。
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