【摘 要】
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目的探讨慢病毒载体介导人TNF-β基因对结直肠癌细胞HCT116作用的研究方法：培养HCT116细胞系,通过慢病毒载体介导TNF-β基因的感染,将细胞分为感染慢病毒载体介导TNF-β基因细
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目的探讨慢病毒载体介导人TNF-β基因对结直肠癌细胞HCT116作用的研究方法：培养HCT116细胞系,通过慢病毒载体介导TNF-β基因的感染,将细胞分为感染慢病毒载体介导TNF-β基因细胞组(实验组),无TNF-β基因的慢病毒细胞组(阴性对照组),HCT116细胞(空白对照组)。采用实时荧光定量RT-PCR检测感染后TNF-β基因mRNA水平表达情况,通过MTT实验,检测三组细胞生长活性。结果：通过在荧光显微镜下观察HCT116细胞内绿色荧光蛋白的表达发现慢病毒感染细胞后48h,细胞的感染效率大于95%,慢病毒对HCT116细胞的感染效率非常高。实时荧光定量RT-PCR实验所得数据分析显示慢病毒载体介导的TNF-β基因感染HCT116细胞后TNF-βmRNA的表达在12h、24h、48h、72h和5d均明显高于阴性对照组和空白对照组,且差异均有统计学意义(P均<0.05),而阴性对照组和空白对照组之间差别无统计学意义(P>0.05)。在MTT实验中,从第1天起,实验组细胞生长就受到抑制,与其他组出现差异(P<0.05),而阴性对照组和空白对照组差别无统计学意义(P>0.05)。从第2天开始,阴性对照组与空白对照组比较也出现生长减慢,并且差别均有统计学意义(P<0.05),提示通过TNF-β感染后,细胞生长明显减慢。结论：慢病毒介导人的TNF-β基因对结直肠癌细胞HCT116有明显抑制作用。这为基因治疗结直肠癌提供了新的理论途径。
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