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目的:儿童肥胖问题已日趋严重,关于肥胖的预防和治疗问题,一直受社会高度重视。运动能够促进白色脂肪组织棕色化,增加能量消耗,是减肥的有效手段。外泌体是一种新型高效的细胞间遗传信息传递媒介,能够参与组织细胞间通讯,深受研究者们的青睐。另有研究表明,运动可促进外泌体的释放,使其胞内成分发生改变,进而发挥出不同的生物学效应。但是运动训练与外泌体mi RNA作用机制的相关研究较少。因此,本研究以未成年小鼠为实验对象,运动和高脂作为干预因素,模拟儿童肥胖发生发展过程,观察运动对外泌体mi RNA和白色脂肪组织棕色化的影响,探究运动影响白色脂肪组织棕色化的可能机制研究方法:60只3-4周龄C57BL/6雄性小鼠被随机分为6组(n=10):基础安静组(CON-S)、基础运动1小时组(CON-PA1)、基础运动2小时组(CON-PA2)、高脂安静组(HFD-S)、高脂运动1小时组(HFD-PA1)、高脂运动2小时组(HFDPA2)。基础组进食基础饲料,高脂组进食含60%脂肪的饲料。运动方案:所有运动组小鼠均每天进行游泳运动,5天/周,1次/天,运动时间分别为60和120min/次,总共干预10周。实验结束后将小鼠麻醉处死,收集血清,采用超速离心法提取小鼠血清外泌体,ELISA试剂盒检测血脂水平;收取脂肪组织,用HE染色方法观察其组织学形态变化,Western blot方法检测血清外泌体表面标记物蛋白和皮下白色脂肪组织棕色化蛋白表达水平,RT-PCR方法检测血清外泌体中mi R-455和皮下白色脂肪组织中棕色化相关蛋白m RNA表达水平。结果:1.实验结束后,比较各组小鼠能量摄入、体重和内脏脂肪含量。结果显示,与CON-S相比,CON-PA1组和CON-PA2组小鼠的能量摄入明显下降(P均<0.01);与HFD-S组相比,HFD-PA1组和HFD-PA2组小鼠的能量摄入明显下降(P均<0.05)。与CON-S组比,HFD-S组的体重显著升高(P<0.05或P<0.01);与安静组相比,基础运动组从第4周开始体重明显下降(P<0.05或P<0.01),高脂运动组从第2周开始体重就出现显著下降(P<0.05或P<0.01)。HFD-S组的肾周和附睾周脂肪蓄积较多,显著高于CON-S组(P均<0.01);HFD-PA2组附睾周脂肪明显少于HFD-S组(P均<0.05)。2.2.各组小鼠血脂水平检测结果显示,与CON-S相比,HFD-S组小鼠的甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TCHO)和(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平升高(P均<0.05)。与CON-S相比,CONPA2组小鼠的TG、TCHO和LDL-C水平均降低(P均<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平升高(P<0.05);与HFDS相比,HFD-PA2组小鼠的TG、TCHO水平也均降低(P均<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05)。3.检测皮下白色脂肪组织棕色化相关指标,结果显示,与CON-S组相比,HFD-S组PR结构域蛋白16(PR domain-containing 16,PRDM16)基因表达水平明显上升(P<0.05)。与HFD-S相比,HFD-PA2组小鼠的解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)基因表达水平显著升高(P<0.05)。与CON-S组相比,HFD-S组UCP1、PRDM16蛋白表达水平明显降低(P均<0.05)。与CON-S相比,CONPA2组小鼠的UCP1、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferatoractivated receptor-γ,PPAR-γ)、PPAR-γ共激活因子-1α(PPAR-γcoactivator-1α,PGC-1α)、PRDM16蛋白表达水平显著升高(P均<0.05)。与HFD-S相比,HFDPA2组小鼠的UCP1、PPAR-γ、PRDM16蛋白表达水平升高(P均<0.05)。4.Western blot实验结果显示,提取的各组小鼠血清外泌体,其表面均有外泌体蛋白CD9,CD63的存在。5.检测各组小鼠血清中外泌体mi R-455含量,结果显示,与CON-S组比,HFD-S组血清外泌体mi R-455水平显著降低(P<0.05)。与安静组相比,基础饮食运动组和高脂饮食运动组血清外泌体mi R-455水平均有上升趋势,且CONPA2组具有显著差异(P<0.05)。6.检测小鼠脂肪组织白色脂肪棕色化通路中相关蛋白,结果显示,与CONS组相比,HFD-S组HIF1an蛋白表达水平明显升高(P<0.01),腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、p-AMPK、UCP1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。与安静组相比,不论是基础饮食还是高脂饮食,运动组小鼠的HIF1an蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与CON-S组相比,CON-PA2组小鼠的AMPK、p-AMPK、PGC-1α、UCP1蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。与HFD-S相比,HFD-PA2组小鼠的AMPK、p-AMPK、UCP1蛋白表达水平升高(P均<0.05)。结论:1.10周游泳运动可减缓未成年小鼠肥胖进程,改善血脂异常,促进皮下白色脂肪组织棕色化进展。2.长时间运动训练可使未成年小鼠血清外泌体中mi R-455水平升高。3.外泌体中mi R-455可能通过靶向抑制HIF1an,增强AMPK活性,激活PGC-1α,上调UCP1蛋白表达水平,参与运动促进白色脂肪组织棕色化进程。