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目的基于Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路,探讨电针干预骨关节炎软骨退变的机制。方法1.2月龄SPF级SD雄性大鼠40只,随机分为4组,即假手术组:假手术后正常饲养,不做任何干预;造模组:造模后正常饲养,不做任何干预;实验1组:造模后,电针治疗15min/day;实验2组:造模后,电针治疗30min/day。每两周各组称重,记录体重变化。制备动脉血清、膝关节滑膜、股骨髁软骨样品。HE染色和甲苯胺蓝染色观察股骨髁软骨表面形态学变化;Elisa检测滑膜组织IL-1β表达变化;Western-blot检测关节软骨 ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-3、MMP-13、Ras、Raf、MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2、c-fos、c-jun 及 c-myc 蛋白表达变化。2.4周龄SPF级SD雄性大鼠10只,运用机械-酶消化法获取大鼠膝关节软骨细胞,体外原代培养及传代培养,采用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞的内外形态结构,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色对体外软骨细胞进行鉴定。采用不同浓度脂多糖分别干预体外软骨细胞,Elisa法检测筛选脂多糖较佳作用浓度及时间,建立体外软骨细胞炎症模型。脂多糖和各组含血清培养液(空白血清组、模型组、U0126组、电针15min组、电针30min组)分别干预软骨细胞,激光共聚焦观察软骨细胞CollagenⅡ、ADAMTS-4蛋白表达变化;Western-blot 检测软骨细胞 Ras、Raf、MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、c-fos、c-jun及c-myc蛋白表达变化;q-PCR检测软骨细胞miR-34a、miR-146a及miR-27b基因表达变化。结果1.大鼠的平均体重,造模组显著高于假手术组(P<0.05),实验1组和实验2组显著低于造模组(P<0.01),实验1组、实验2组与假手术组无明显差异(P>0.05);膝关节滑膜组织IL-1β的表达,造模组显著高于假手术组(P<0.01),实验1组和实验2组显著低于造模组(P<0.01);软骨组织 ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-3、MMP-13、Ras、Raf、MEK、p-ERK1/2、c-fos、c-jun及c-myc蛋白的表达,造模组显著高于假手术组(P<0.01),实验1组和实验2组显著低于造模组(P<0.01,P<0.05)。2.脂多糖诱导体外软骨细胞炎症模型的较佳作用浓度为10 ng/ml,干预时间为8 h;软骨细胞上清液MMP-3、MMP-9及MMP-13的表达,模型组显著高于空白血清组(P<0.01或P<0.05),电针15min组、电针30min组及U0126组显著低于模型组(?<0.01 或 P<0.05);软骨细胞 Ras、Raf、MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、c-fos、c-jun、c-myc及ADAMTS-4蛋白的表达,模型组显著高于空白血清组(P<0.01),电针15min组、电针30min组及U0126组显著低于造模组(P<0.01);软骨细胞Collagen Ⅱ蛋白的表达,模型组显著低于空白血清组,电针15min组、电针30min组及U0126组显著高于模型组;软骨细胞miR-34a及miR-146a基因的表达,模型组显著高于空白血清组(P<0.05),电针15min组、电针30min组及U0126组显著低于模型组(P<0.05);miR-27b基因的表达,模型组显著低于空白血清组(P<0.05),电针15min组、电针30min组及U0126组显著高于模型组(P<0.05)。结论1电针能显著改善膝骨关节炎软骨的形态结构,保护关节软骨,抑制滑膜炎症和关节软骨ERK1/2信号转导通路及下游因子的激活,延缓OA软骨退变。2电针后血清能显著下调软骨细胞促炎因子的表达,抑制软骨细胞ERK1/2信号转导通路及下游因子的激活,促进软骨细胞Ⅱ型胶原的合成;且通过调控mRNA的起始调控因子miRNAs,抑制炎症介导的软骨细胞凋亡。