壳聚糖固载酶的葡萄糖电化学传感器的研究

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糖尿病是世界性的多发病和常见病。它严重地威胁着人类的健康,是仅次于心血管病和癌症的第三大危险疾病。因此糖尿病的诊断和治疗是全世界生物医学工程面临的重大课题。葡萄糖生物传感器具有选择性高、简便、快速的特点,是检测葡萄糖浓度最常用的方法。 在酶的固定化和生物传感器技术日新月异的今天,寻求新的载体材料,改进固定化方法,改善检测手段已成为众多科研工作者为之努力的方向。生物材料有很好的生物兼容性,可以为酶的固定化提供良好的生物环境,保持酶的使用寿命,在酶的固定化过程中也不需要引入过多的化学试剂,不容易引起酶的变性失活,因此生物材料用于固定化酶已经越来越引起人们的注意。其中壳聚糖的应用越来越广泛。它是部分脱乙酰基的甲壳素,可溶于酸性水溶液,具有良好的生物相容性、无毒、抗菌等优点,溶于酸性水溶液成粘稠液体,在一定条件下可成为薄膜或凝胶。用壳聚糖制成的多孔膜和多孔微颗粒可作为酶、抗原、抗体等生理活性物质的固定化载体,固定酶的效率高,反应活性高。 本文在总结国内外近年来葡萄糖生物传感器研究成果的基础上,分别用壳聚糖包埋酶、壳聚糖二氧化硅溶胶凝胶包埋酶及壳聚糖与戊二醛交联固定酶三种方法制备了葡萄糖电化学生物传感器,并采用普鲁士兰对电极进行修饰,抑制实际样品中其它电活性物质的干扰。三种方法相比较,用壳聚糖、戊二醛交联制备的葡萄糖生物传感器的稳定性要远远优于前两种方法,说明交联法制备传感器有一定的优越性,但稳定性的提高仍有待于进一步研究。将制成的传感器用于葡萄糖浓度的测定,响应时间短,葡萄糖浓度在一定范围内与响应电流有较好的线性关系。当葡萄糖浓度过大时,响应电流与葡萄糖浓度基本无关,表现出Michealis-Menten动力学特征。对于人血清中血糖浓度进行测定,平均回收率在88.5%~100.6%之间。
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