Terrequinone A是由构巢曲霉(Aspergillus nidulans)分泌的具有抗癌活性的二级代谢产物，有着广阔的应用前景和市场潜力。但通过微生物培养提取活性物质存在着含量低、分离纯化步骤复杂、消耗大量天然资源等问题。由于TerrequinoneA及其衍生物的结构特点是都有一个双吲哚醌结构，结构比较复杂，化学合成步骤长、产率低、成本高等因素严重制约着化学合成Terrequinone A的产业化开发。随着合成生物学研究的兴起，天然药物的生物催化技术凭借其诸多优势，如：反应条件温和、溶剂无污染、高催化活性及选择性、底物的功能基无需保护等，在环保和成本方面明显优于传统的化学合成。　　 本研究借助基因组和蛋白质组技术，通过巢式PCR等技术手段克隆构巢曲霉中Terrequinone A的合成基因分别重组到表达载体pET24a(+)中，重组质粒分别在大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3)宿主中表达得到五种酶蛋白(TdiA.TdiB.TdiC.TdiD.TdiE)，并研究大肠杆菌稀有密码子对真核基因在原核宿主中的表达效率的影响。利用分离纯化后的TdiD在溶液中将L-色氨酸转化成IPA,TdiA催化IPA合成Terrequinone A中间体Didemethylasterriquinone D，TdiB、TdiC和TdiE在辅助因子的参与下合成得到了终产物TerrequinoneA。在分析游离酶催化性能的基础上，将固定化酶技术引入到TerrequinoneA的酶促全合成中，分别将TdiA、TdiD固定到氨基和环氧载体上进行催化，初步研究表明氨基载体固定化TdiD成功的将L-色氨酸转化成IPA，氨基载体固定化TdiA催化IPA合成了Didemethylasterriquinone D。　　 借助本课题对天然产物TerrequinoneA固定化酶催化合成的初步研究，为提高天然产物的体外酶促全合成效率打下基础，寻找突破现今天然产物制备过程中植物提取含量较少和化学合成收率低的瓶颈问题的新思路，实现天然药物的制备成本大幅度降低。