【摘 要】
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本文探讨了维甲酸（RA）诱导小鼠成神经瘤细胞N2a的分化,并研究microRNA （miRNA）对RA诱导神经元分化中的作用。首先,我们验证了N2a是否能在维甲酸（RA）的诱导下分化为神经元。结果表明,经过5天的RA诱导,N2a细胞的神经突起延伸,胞体面积增大,有明显的分化诱导作用,分化的N2a细胞占总细胞的数量约为40%。进一步的实验表明,成熟神经元标记蛋白MAP2的表达量明显增加,证实了经RA
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本文探讨了维甲酸（RA）诱导小鼠成神经瘤细胞N2a的分化,并研究microRNA （miRNA）对RA诱导神经元分化中的作用。首先,我们验证了N2a是否能在维甲酸（RA）的诱导下分化为神经元。结果表明,经过5天的RA诱导,N2a细胞的神经突起延伸,胞体面积增大,有明显的分化诱导作用,分化的N2a细胞占总细胞的数量约为40%。进一步的实验表明,成熟神经元标记蛋白MAP2的表达量明显增加,证实了经RA处理后,N2a细胞向神经元方向分化。 大量实验表明,miRNA在神经系统发育和神经元分化过程中起重要作用,但miRNA在RA诱导的N2a细胞分化过程中的作用尚未见报道。本文系统检测了RA诱导N2a细胞后miRNA的表达变化,其中包括了]miR-124、miR-125b、miR-9和let-7a。实验结果表明,N2a细胞经过RA处理后,miR-124、miR-9表达量明显上升,而miR-125b的表达量下降,let-7a的表达没有发生显著改变。 我们检测了三种miRNA在N2a细胞分化中的作用,首先,在N2a细胞中过量表达或抑制miR-124,然后通过观察细胞的形态变化检测其对神经细胞分化的作用。实验结果表明,过量表达miR-124能有效诱导N2a细胞神经突起的生长,而抑制过表达的miR-124则几乎完全阻断了这种形态变化。免疫组化分析表明,过量表达miR-124后,MAP2蛋白的表达量明显增加,进一步证实了,miR-124过量表达诱导了N2a细胞向神经元方向分化。过量表达miR-125、miR-9后,对N2a细胞的分化没有显著影响。
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