大气颗粒物生物氧化性评价技术的建立及应用

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流行病学研究表明,大气颗粒物暴露水平与人体健康密切相关。虽然颗粒物的致毒机理还不甚清楚,但目前普遍认为,由于活性氧物质过度积累而引起的机体氧化应激效应是颗粒物导致机体损伤最重要的机理之一。然而,关于大气颗粒物活性氧检测技术的研究还不够深入,其应用也存在一定的局限性。因此,建立可靠、统一的大气颗粒物生物氧化性评价技术,定量表达大气颗粒物的氧化损伤水平,对准确评估颗粒物对人体健康的影响具有重要的意义。  本研究以大鼠肺泡巨噬细胞为细胞模型,二氯荧光素为探针,对颗粒物诱导细胞产生的活性氧的分析方法进行研究。通过条件实验,对颗粒物水溶性组分提取方法、颗粒物暴露时间、细胞计数方法、细胞类型、细胞数量、探针浓度和酵母聚糖浓度、颗粒物的响应范围等参数进行了优化,并进行了方法的敏感性和颗粒物溶液的稳定性分析,最终建立了利用大鼠肺泡巨噬细胞定量表达大气颗粒物生物氧化性的技术。  为进一步验证技术的可靠性,本研究利用所采集的大气细颗粒样品,与美国威斯康星州立卫生学实验室进行了国际比对。以绝对荧光值、相对荧光值、颗粒物质量-酵母聚糖校正和采样体积-酵母聚糖校正后颗粒物的活性氧浓度来表征大气颗粒物的生物氧化性,两个实验室的分析结果具有较好的一致性,上述参数的线性相关系数分别为0.92、0.89、0.53和0.85。  利用所建立的方法,我们测定了广东省鹤山市不同粒径段颗粒物样品的生物氧化性。结果表明,不同粒径大气颗粒物的生物氧化性具有一定的差异,粗颗粒的活性氧水平低于细颗粒,而0.32-0.5μm粒径段的颗粒物活性氧水平最高。
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