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目的： 1.体外研究观察炎症反应中小鼠骨髓间充质干细胞对血管内皮细胞TM表达的影响。 2.探讨骨髓间质干细胞对炎症早期凝血紊乱的影响。 方法： 1.体外原代培养小鼠骨髓间充质干细胞，细胞贴壁差速法原代提取培养小鼠主动脉血管内皮细胞，肺泡内灌洗液原代培养小鼠肺泡内巨噬细胞，10％FBS培养基培养细胞，显微镜下观察细胞生长状况。 2.将原代培养的第四代血管内皮细胞进行细胞爬片后，对细胞进行Ⅷ因子相关抗原即血管性血友病因子(von Willebrand factor, vWF)免疫荧光化学反应，观察并根据荧光显微镜下血管内皮细胞的vWF表达状况进行细胞鉴定，阳性信号为绿色荧光。 3.将第五代小鼠骨髓间质干细胞分为对照组和诱导组，对照组细胞按10％FBS完全培养基培养，诱导组细胞用配制好的细胞成脂诱导培养液培养，两组细胞在相同条件下培养2周后，用油红染色，显微镜下观察细胞胞质内是否有脂滴形成。 4.以肺泡巨噬细胞和血管内皮细胞体外共培养为基础，LPS不同浓度0ug/ml，0.01ug/ml，0.1ug/ml，1ug/ml，10ug/ml刺激培养的细胞，不同作用时间0h，3h，6h，12h刺激培养的细胞，观察TM动态变化，以选择LPS的最佳作用浓度和时间。 5.以肺泡巨噬细胞和血管内皮细胞体外共培养为基础，以PBS刺激为对照，将细胞分为四组，即BMSCs对照组、空白对照组、BMSCs治疗组及脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)对照组。BMSCs对照组和BMSCs治疗组为三种细胞体外共培养，BMSCs治疗组及脂多糖对照组两组加入LPS刺激，LPS终浓度为1ug/ml。LPS刺激6h后，提取RNA和蛋白质，通过实时荧光定量PCR技术和Western blotting技术检测各组6h TM的基因和蛋白表达变化，以及蛋白定量检测与细胞凋亡有关的蛋白BAX和BCL-2变化，BAX/BCL-2的比值变化。 结果： 1.荧光显微镜下观察血管内皮细胞vWF表达并拍照，可见各细胞表面有几乎布满绿色荧光，vWF的阳性信号为绿色荧光，可鉴定从主动脉血管提取的原代培养细胞为血管内皮细胞。 2.显微镜下可见对照组小鼠间充质干细胞胞质内没有明显变化，诱导组小鼠BMSCs胞质内出现大小不等的脂滴并被油红染色成橙红色，说明小鼠BMSCs细胞具有可被诱导向脂肪细胞分化的能力。 3.用LPS五个不同浓度分别刺激细胞6h后，LPS用量浓度为1ug/ml时，内皮细胞TM明显低于其他浓度(P＜0.001)，以1ug/ml LPS浓度作用细胞0h，3h，6h，12h四个时间点，LPS作用6h时，TM明显减少，低于其他三组。LPS在浓度为1ug/ml，作用时间6h时，内皮细胞TM减少最明显(P＜0.05)，作为LPS的最佳作用浓度和时间。 4.四组血管内皮细胞TM mRNA的表达量有所差异，其中BMSCs对照组与空白对照组TM mRNA表达无显著差异(P＞0.05);与BMSCs对照组、空白对照组比较，LPS对照组血管内皮细胞TM的mRNA表达量相对明显减少(P＜0.05);与LPS对照组相比，BMSCs治疗组血管内细胞TM的mRNA表达量相对明显增加(P＜0.01)。 5.四组血管内皮细胞TM蛋白的表达量也有所差异，与LPS对照组相比，BMSCs治疗组血管内细胞TM的蛋白表达量明显增加(P＜0.01);与BMSCs对照组、空白对照组比较，LPS对照组血管内皮细胞TM的蛋白表达量相对明显减少(P＜0.05);而BMSCs对照组与空白对照组TM蛋白表达量无明显差异(P＞0.05)。 6.LPS对照组细胞凋亡基因Bax蛋白表达量明显高于其他三组(P＜0.05)，并且BMSCs治疗组细胞抑制基因Bcl-2蛋白表达量明显高于其他三组(P＜0.05)，BMSCs治疗组BAX/BCL-2比值低于LPS对照组(P＜0.05)。 结论： 1.LPS刺激后血管内皮细胞TM mRNA和蛋白表达减少，细胞凋亡基因BAX蛋白表达增加。 2.BMSCs能有效增加LPS刺激后内皮细胞TM的表达，改善早期炎症的凝血紊乱，同时可影响细胞BAX/BCL-2的表达，改善细胞凋亡。