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近年来,抗菌药物常被作为食品动物的添加剂或临床药物治疗使用,导致猪源大肠杆菌的耐药性问题愈加严重,特别是多重耐药菌株的出现,使得多年来被弃用的具有肾毒性作用的粘菌素重新回归临床使用。但这一现状并未维持很久,粘菌素这道防线于2015年被细菌成功攻破。本研究对2015-2016年从七省(安徽、河南、湖南、湖北、江西、山西、陕西)采集的病料样本进行大肠杆菌分离鉴定,采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行八大类13种抗菌药物的敏感性试验,并对其携带耐药基因进行PCR检测及测序分析;采用ERIC分型、多位点序列分型(MLST)和质粒接合试验方法,对mcr-1阳性菌株的克隆和水平传播进行分析;对mcr-1阳性重点接合菌株进行质粒全序列测序,分析mcr-1质粒分子特性,对mcr-1的传播控制提供依据。猪大肠杆菌中mcr-1的阳性检出率为25.5%(78/306),其中从病猪体内分离的102株大肠杆菌中检测出46株阳性,占比45.1%,从健康猪体内分离的204株大肠杆菌中检测出32株阳性,占比15.7%(P=0.000)。同时,前者对粘菌素、头孢噻呋、头孢喹肟、庆大霉素、阿米卡星、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、喹乙醇、呈现更为严重的耐药,这与是否携带mcr-1具有相似的耐药情况,除了阿米卡星和多西环素。并且,mcr-1阳性大肠杆菌的耐药表型比mcr-1阴性耐药更为广泛。306株菌对13种抗菌药物均表现不同程度的耐药,阿莫西林、土霉素、磺胺-6-甲氧嘧啶/三甲氧苄啶(5/1)的耐药率非常严重,依次为100%、97.4%、96.1%,乙酰甲喹、阿米卡星、喹乙醇的耐药率相对较低分别为3.3%、4.3%、14.1%,β-内酰胺类药物头孢噻呋和头孢喹肟的耐药率均为27.1%,氨基糖苷类药物庆大霉素耐药率为31.4%,四环素类药物多西环素耐药率达到62.1%,酰胺醇类药物氟苯尼考耐药率为71.6%,多肽类抗菌药粘菌素耐药率为26.5%,喹诺酮类抗菌药恩诺沙星的耐药为33.0%;PCR结果显示,耐药基因tetA、floR、sul检出率达到60%以上,oqxA、oqxB、qnrD检出率在36.9%以上,blaTEM、mcr-1和blaCTX-M检出率达到24.8%以上,rmtB、aac(6’)-Ib-cr检出率分别为2.6%(8/306)、5.2%(16/306);接合试验结果表明32.1%(25/78)的mcr-1阳性菌株可通过质粒在菌属间传递mcr-1耐药基因,且通过接合子的药敏试验发现接合子除对粘菌素耐药外,对其他抗菌药也存在多种耐药;对mcr-1阳性菌株EPF03的接合子质粒进行质粒全序列测序,结果表明mcr-1阳性质粒属于IncHI2型,mcr-1基因上游存在ISApl1插入序列,且质粒上还同时携带oqxAB-sul1-sul2-sul3-floR-aac(3)-IVa-blaCTX-M-14-fosA3等多种耐药基因。多位点序列分型(MLST)结果表明46.2%(36/78)的mcr-1阳性菌株间存在克隆传播关系,且属于ST10克隆群。七省猪源大肠杆菌耐药广泛,且耐药基因复杂多样,头孢噻呋、头孢喹肟、阿米卡星、喹诺酮类、喹噁啉类、可作为临床首选药物。mcr-1耐药基因主要以水平和克隆两种方式传播。