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日本新糠虾(Neomysis japonica)隶属于节肢动物门(Athropoda)甲壳纲(Crustacea),广泛分布于我国黄渤海沿岸,生物量大。日本新糠虾营底栖生活,杂食性,一年可繁殖多次。我国沿海一带及日本、印度食用鲜虾及做虾酱,糠虾还是家禽及海洋鱼类的优良饵料。 通过实验室条件下养殖日本新糠虾观察到,日本新糠虾死亡半小时后头胸部与腹部即断开,发生自溶现象,因此推测在其体内可能存在与南极大磷虾类似的相对较为高效的蛋白酶体系。目前磷虾酶已应用于医学、洗涤剂工业等领域,已有研究利用脊椎动物胰蛋白酶以及细菌蛋白酶开发利用海洋低值蛋白。因此研究糠虾的蛋白酶理化性质、胰蛋白酶样酶纯化方法及其理化性质具有一定的理论意义及潜在的应用价值。 本文进行了下列工作:日本新糠虾的消化系统组织学及其消化酶分布的研究;对日本新糠虾蛋白酶粗酶的理化性质进行了探讨;通过硫酸铵分级沉淀并采用两种不同配基对其胰蛋白酶样酶作亲和层析提纯,并对纯化后的胰蛋白酶样酶相关的理化性质进行了探讨。 日本新糠虾的消化系统主要分为前肠、中肠、后肠三部分。中肠腺发达,其吸收细胞、分泌细胞的分泌作用显著。 通过饱和度为25%~50%之间硫酸铵沉淀并采用Benzamidine(苯甲脒)-Sepharose 4B亲和层析或CEOM(鸡卵类粘蛋白)-Sepharose 4B亲和层析获得分子量大约为25.7kDa的日本新糠虾胰蛋白酶样酶。 日本新糠虾蛋白酶粗酶及胰蛋白酶样酶的适宜温度均为25~50℃,pH值为6.0(7.0)~11.0,最适反应温度、pH值为37℃,pH8.0,其对温度、pH的适应性与南极大磷虾类似。日本新糠虾胰蛋白酶样酶在37℃、pH8.0条件下比牛胰蛋白酶具有较高的降解效率。因此日本新糠虾蛋白酶、胰蛋白酶样酶有着较为广阔的应用前景。