Ku80蛋白缺陷小鼠成纤维细胞放射后DNA双链断裂再连接

来源 :昆明医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:candyyao007
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目的:证实Ku80蛋白在DNA双链断裂修复再连接中的重要作用,进一步探讨缺乏Ku80蛋白细胞的DNA损伤情况、修复能力及与不同剂量x线照射的关系。同时,对所用的实验方法非对称电场反向凝胶电泳(Asymmetric Field Inversion Gel Electrophoresis,AFIGE)技术和实验细胞对象的可靠性和稳定性做出一般评价。 方法:用不同剂量x线在不同时间点照射经C-myc原癌基因转染的来源于Ku80+/+,Ku80+/-和Ku80-/-小鼠胚胎成纤维永生细胞系。用非对称电场反向凝胶电泳(AFIGE)对不同时间点DNA双链断裂量进行测量,比较各细胞株之间不同照射剂量、不同修复时间DNA损伤程度活性比(FAR),以判断各细胞株DNA对x线照射的放射损伤敏感性和修复能力。 结果:1)缺乏Ku80蛋白的细胞有很高的放射敏感性;2)Ku80+/+、Kk80+/-与Ku80-/-三株细胞在同一剂量照射下DNA双链损伤程度(FAR)无明显差别;3)和Ku80+/+、Ku80+/-细胞株相比较,Ku80-/-细胞存在明显的DNA双链断裂修复能力不足;4)用10Gy、25Gy、40Gy照射Ku80-/-细胞后DNA双链断裂修复能力无差别。 结论:Ku蛋白在放射引起DNA双链断裂修复、再连接中具有重要作用,Ku80蛋白缺乏细胞的DNA双链断裂后的重组修复能力的缺陷是固有的,并不因放射剂量的改变而不同。Ku80对研究肿瘤预后、靶向治疗、肿瘤细胞放射敏感性及放射治疗具有指导意义。
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