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[目的]: 1.建立SD大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)动物模型,观察其速发相及迟发相变化,并观察鼻黏膜的组织学变化。
2.研究脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体TrkB在实验性变应性鼻炎鼻黏膜中的表达情况,并探讨它们与变应性鼻炎之间的关系。
[方法]: 30只健康SD大鼠被随机分为正常对照组10只和变应性鼻炎组(AR组)20只,其中AR组又被随机分为激发后30分钟组(速发相反应组,AR1组)10只和激发后9小时组(迟发相反应组,AR2组)10只。AR模型的建立方法:首先在SD大鼠的腹腔注入卵清蛋白和氢氧化铝的混合液进行基础致敏,然后再向鼻腔滴入5%卵清蛋白溶液进行激发。用HE及甲苯胺蓝染色方法观察变应性鼻炎鼻黏膜中嗜酸性粒细胞、上皮下腺体及肥大细胞等组织学改变;用免疫组织化学(Envision二步法)分别检测BDNF及TrkB在鼻黏膜中的表达和变化;利用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测鼻黏膜中。BDNFmRNA的表达及变化情况。
[结果]: 1.HE及甲苯胺蓝染色显示:相比正常对照组,AR1、AR2组大鼠鼻黏膜均表现为鼻黏膜结构被破坏,腺体增生,鼻黏膜微血管扩张、增生,肥大细胞、嗜酸性粒细胞等炎性细胞浸润,其中AR2组腺体增生及嗜酸性粒细胞浸润更明显。
2.免疫组织化学:BDNF主要表达于鼻黏膜上皮细胞、腺细胞和固有层-些炎性细胞的胞质内,以及部分腺细胞胞核内;TrkB主要表达于鼻黏膜上皮细胞、腺细胞及某些炎性细胞的胞质及胞膜。AR1组、AR2组和正常对照组鼻黏膜中BDNF的积分光密度(iOD)值分别为83583.12±29843.21、8607.10±23728.03和56888.77±14879.07,AR1、AR2组与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05),AR1组与AR2组比较无统计学意义(P>0.05);AR1组、AR2组和正常对照组鼻黏膜中TrkB的iOD值分别为89741.84±9147.77、98043.46±21561.14及71525.57±14957.62,AR1、AR2组与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05),AR1组与AR2组比较无统计学意义(P>0.05);BDNF及TrkB蛋白表达水平在AR1组、AR2组显著高于正常对照组,且BDNF与TrkB有相关性(P<0.05),相关系数为0.593。 3.RT-PCR:AR1组、AR2组和正常对照组鼻黏膜中BDNF相对密度分别为0.48±0.13、0.53±0.09及0.29±0.02。AR1、AR2组与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05),AR1组与AR2组比较无统计学意义(P>0.05)。
[结论]: 变应性鼻炎速发相及迟发相的病理改变有相似之处,如腺体增生、血管扩张等。脑源性神经营养因子及其受体TrkB蛋白表达在速发相及迟发相反应时较正常对照组均有明显增高,提示BDNF及TrkB参与变应性鼻炎中两时相的发生发展,且BDNF可能主要通过与其受体TrkB结合而影响变应性鼻炎的发生发展。AR组鼻黏膜中BDNFmRNA的表达明显高于正常对照组,进一步从基因水平说明了BDNF参与变应性鼻炎的发病。