前言 口腔鳞癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,其发生率约占癌瘤的80%以上。由于鳞癌发生的部位不同,其组织结构、恶性程度、转移部位及治疗方法等方面也均有所不同。 蛋白激酶A（Protein Kinase A, PKA）为依赖cAMP（环腺苷酸,cyclic adenosine monomphsopate）的蛋白激酶,有传递胞外的刺激信号,影响膜蛋白的磷酸化而改变细胞膜的通透性,调控细胞的增殖、分化和凋亡等作用。因此蛋白激酶A的调控障碍在细胞的异常生长和增殖中起到了重要作用。蛋白激酶A有两种亚型,即Ⅰ型蛋白激酶A（PKA Ⅰ）和Ⅱ型蛋白激酶A（PKA Ⅱ）。PKA Ⅰ作为cAMP的主要调节子,近年来关于其在肿瘤方面的研究越来越多。许多证据显示PKA Ⅰ在癌细胞系、原发性肿瘤和增生过度的细胞中呈过度表达。本实验应用免疫组织化学、Western blot和检测同位素放射,对PKA Ⅰ在口腔鳞癌中的表达和活性进行研究,探讨PKA Ⅰ与口腔鳞癌发生的关系,并且分析PKA Ⅰ作为诊断口腔鳞癌生物学指标的可能性。 材料及方法 1.标本来源:收集口腔鳞癌蜡块标本40例,正常口腔粘膜组织15例。全部标本均取自中国医科大学附属第一医院病理室,经两位病理学教授确诊并根据UICC2002年分期标准进行临床分期。口腔鳞癌新鲜标本20例均来自中国医科大学第一临床学院口腔颌面外科手术切除标本并经病理证实。快速将新鲜肿瘤组织及距肿瘤2 cm处正常组织切取下来,约0.5g,立即用冷PBS冲洗并去除坏死组织,然后置于-70℃冰箱中贮存。 2.实验试剂:[γ-³²p]ATP、胎牛血清、HRP-马抗鼠IgG（二抗）、硝酸