上海飞散致敏花粉与典型大气污染之间的复合污染特征及其诱导的致敏蛋白表达差异研究

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采集了上海春季飞散花粉并获取其空间分布规律,结合同期大气污染物的污染物的变化规律,对飞散花粉与大气污染之间的复合污染特征进行了研究;设计、组装了典型大气污染物与花粉的共暴露装置,模拟花粉对污染物质的吸附特征。利用带能谱的电子扫描显微镜(SEM/EDX)、电子自旋共振技术(ERP)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)、二维电泳(2DE)、串级质谱(MS)等方法对暴露前后的上海市典型飞散致敏花粉悬铃木花粉的微观形貌、变应原蛋白表达进行了研究。扫描电子显微镜的结果显示,未经暴露的悬铃木花粉表面较清洁,而在暴露1个小时和8个小时后的花粉的表面有较多颗粒附着,并有块状突起。采自宝山区和普陀区的悬铃木花粉的表面附着了不同化学组分的颗粒物,反应不同区域污染物来源存在差异。所有采样点的悬铃木花粉和纯花粉在暴露后都表现出了自由基信号减弱的趋势。纯花粉与SO2、NO2、NH3混合气体暴露时间越长,自由基信号强度越弱,纯花粉在与DEPs混合暴露后自由基信号强度增加。SDS-PAGE电泳结果表明,几条比较明显的蛋白条带可以显现出来,第一条带显示分子质量为22kDa,第二条带显示分子质量为35kDa,第三条带显示分子质量为39kDa,第四条带显示分子质量71kDa。另外,在颜色比较深的AP8DA样品中还能见到105kDa的条带。比较不同样品的条带可以发现,与DEPs暴露8个小时的花粉样品的条带颜色相对于另外三个较深。与污染气体接触暴露8个小时的样品的条带颜色比1个小时的要深。二维电泳结果显示,与SO2、NO2、NH3混合气体暴露1小时的花粉样品的二维电泳图中显现的蛋白点相对于暴露前明显减少,且颜色较浅。而与SO2、NO2、NH3混合气体暴露8小时的花粉样品的二维电泳图中的蛋白点相对于暴露前也较少,颜色也较浅,但与暴露1小时的花粉样品的二维电泳图相比蛋白点的颜色稍微深一点。结合质谱实验,我们发现,悬铃木花粉中的致敏蛋白Plaa1在悬铃木花粉与DEPs暴露8小时过程中变化最大。
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