原花青素对血脂代谢紊乱小鼠肠道菌群的影响及代谢组学的研究

来源 :上海应用技术大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:wjq12262024
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原花青素广泛存在于自然界中,具有抗氧化活性、干预脂代谢紊乱等功效。原花青素B2是原花青素的二聚体形式,也是食源性原花青素中主要低聚物,但其利用率较低。随着社会经济水平上升,饮食也越来越偏向富含高脂的动物制品,由高脂膳食引起的血脂异常的人群呈现增多趋势,对于脂代谢异常的干预成为研究热点之一,但目前少有对原花青素B2改善血脂代谢紊乱机制的研究报道。本论文通过建立高脂膳食诱导小鼠血脂代谢紊乱模型,给予小鼠膳食补充原花青素B2的干预,评价其对高脂模型小鼠血脂代谢异常的干预作用,并从肠道菌群和代谢组学这两个方面来探究原花青素B2调节血脂代谢紊乱的机理。研究结果如下:(1)选用5周龄雄性C57BL/6小鼠,分为三组(n=9):对照组(CON)、高脂组(HF)、原花青素B2干预组(PB2),饲养12周后,测定小鼠血脂指标、肝脂酶活指标、抗氧化指标和行为学指标。原花青素B2可以显著性降低小鼠腹脂指数,血脂指标TC、TG和AI指数均有显著降低(P<0.05),显著提高血HDL-C及肝组织酶活性中脂蛋白酶活性、肝脂酶活性和总脂酶活性,并显著增强抗氧化活性(T-AOC、SOD、CAT和GSH指标),显著抑制氧化损伤产物MDA含量(P<0.05),表明原花青素B2具有干预高脂膳食性血脂异常及氧化应激。此外,动物行为学实验显示原花青素B2显著提高高脂膳食小鼠在旷场的中心区域路程和中心区域时间及Morris水迷宫实验中的目标象限路程与停留时间,表明原花青素B2可改善高脂膳食小鼠的学习记忆能力。(2)运用Illumina高通量测序技术分析小鼠肠道菌群结构变化。Alpha多样性Sobs和Shannon指数稀释曲线和差异性检验图结果表明对照组、高脂组和原花青素B2存在显著性差异。物种组成Venn图表明对照组中特有的OUT有52个,高脂组中有10个,原花青素B2组有12个。从门与科分类水平分析差异菌群发现,原花青素B2可以使高脂模型小鼠肠道菌群拟杆菌门/厚壁杆菌门(Bacteroidetes/Firmicutes)比值上升,并且增加乳杆菌科(Lactobacillaceae)、消化链球菌科(Peptostreptococcaceae)、拟杆菌科-S24-7组(Bacteroidales-S24-7-group)等菌群的相对丰度。从属分类水平物种差异分析发现,原花青素B2降低高脂模型小鼠肠道菌群的Escherichia-Shigella和Ruminococcaceae等菌群的相对丰度,增加Romboutsia和fissicatenagroup等菌的相对丰度。并且,小鼠粪便中短链脂肪酸分析结果表明原花青素B2可以显著增加高脂小鼠粪便丁酸的含量,表明原花青素B2具有干预高脂膳食引起的肠道菌群结构异常。(3)运用LC-MS技术对小鼠血浆和尿液样本进行数据采集,再运用SIMCA-P和代谢组学数据库(HMDB、KEGG和Mtlin等)查找对比分析。筛选三组差异代谢产物发现了血浆中14种(花生四烯酸、柠檬酸、L-苯丙氨酸、牛磺酸等)与尿液中13种(氨基乙二酸、乙酰肉碱、黄尿酸等)标志性差异代谢产物。其中高脂膳食引起小鼠体内廿二碳四烯酸、棕榈酸、亚油酸、花生四烯酸、柠檬酸、牛磺酸和氨基己二酸等代谢产物含量的减少,原花青素B2干预后花生四烯酸、柠檬酸和牛磺酸等代谢产物含量增加。通路分析表明原花青素B2干预高脂膳食诱导的血脂代谢紊乱主要涉及血浆中参与的5种代谢通路(脂肪酸代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、初级胆汁酸的生物合成、三羧酸循环、芳香族氨基酸生物合成)和尿液中参与的有4种代谢通路(胆汁酸合成、赖氨酸生物合成、氰氨基酸代谢、牛磺酸和次牛磺酸代谢)。原花青素B2可显著干预高脂膳食诱导的小鼠血脂代谢异常和氧化应激,原花青素B2的干预作用可能与肠道菌群结构的调节及脂肪酸代谢、胆汁酸代谢和三羧酸循环等多个代谢途径的调控有关。
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